毛细管电泳紫外检测条件下单碱基分离dna片段-上海有机化学研究所.pdfVIP

2004 年第 62 卷 化 学 学 报 Vol. 62 , 2004 第 1 期 , 66～70 ACTA CHIMICA SINICA No. 1 , 66～70 毛细管电泳紫外检测条件下单碱基分离 DNA 片段 王　前　　许　旭 ( 中国科学院上海有机化学研究所分析测试中心 　上海 200032) ( ) ( ) 摘要 　合成了一种水溶性聚合物 ,聚N , N二甲基丙烯酰胺 PDMA 和聚乙烯吡咯烷酮体系 PVP ,并用于 DNA 分离. 优选 该体系溶液含量为 20 % PDMA + 20 % PVP ,在紫外检测的条件下 ,对标准 DNA 酶切片段pBR322/ Hae III 样品进行分离 ,其 ( ) 为 072. 加入甲酰胺( φ ) 中 123/ 124 碱基对的分离度 R s ≥010 对 DNA 样品进行去活处理后 ,该体系亦能对单链 DNA 片段 ( ) 中的 123/ 124 进行分离 ,分离度 R s 为 075. 实验还显示进样时存在浓缩效应. 本体系粘度较小 ,筛分能力强 ,具备芯片毛 细管 DNA 分离介质的潜力. 关键词 　毛细管电泳 ,无胶筛分 ,合成水溶性聚合物 ,DNA 分离 ,紫外检测器 ,单碱基分离 DNA Separation as Singlebasepair Resolution by Capillary Electrophoresis with Ultraviolet Detector WANG, Qian 　　XU , Xu (Analytical and Testing Center, Shanghai Institute of Organic Chemistry , Chinese Academy of Sciences , Shanghai 200032) Abstract 　The watersoluble mixtures of polymers , poly ( N , Ndimethylacrylamide) ( PDMA) / polyvinylpyrrolidone ( PVP) , were synthesized and used in capillary electrophoresis ( CE) for DNA separation. With the optimal concentration of PDMA/ PVP polymer solution , the doublet of 123/ 124 bp in pBR322/ Hae III Markers could be separated with UV detector and the resolution value was 072. When the denaturant formamide (