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反转录系统 原英文技术手册号码：TB099 本说明书用于产品A3500 。 所有的技术文献均可从公司网站 得到 请访问公司网站以证实您所使用的技术手册为最新版本 I. 介绍………………………………………………………………………………… 1 II. 产品组成 ………………………………………………………………………… 1 III. 反转录操作方法…………………………………………………………… 2 A. 反转录反应…………………………………………………… 2 B. PCR 扩增反应的稀释………………………………………………… 3 IV. 溶液及缓冲液的组成……………………………………………………………… 4 V. 相关产品…………………………………………………………………………… 5 VI. 参考文献…………………………………………………………………………… 6 I. 介绍 AMV 反转录酶利用总RNA 或Poly(A)+RNA 合成单链cDNA 。反转录系统提供 经过检验的试剂，能够在 15 分钟之内对总 RNA 或 Poly(A)+RNA 进行高效的反转 录。同时提供一个1.2kb 多聚腺苷酸尾的转录本作为cDNA 合成反应的对照模板。 利用反转录系统合成的cDNA 可直接用于PCR 反应。 II. 产品组成 产品 包装 目录号 反转录系统 100 次反应 A3500 实验室使用。每个系统提供足够进行100 次反应所需的试剂，每次反应可处理1µg RNA。包括： ． 1500u AMV 反转录酶（高浓度） ． 2500u 重组的RNasin® 核糖核酸酶抑制剂 ． 50µg Oligo(dT)15 引物 (0.5µg/µl) ． 50µg 随机引物 (0.5µg/µl) ． 5µg 1.2kb 卡那霉素阳性对照RNA (0.25µg/µl), 10µl 注意：本中文操作手册仅供实验参考，在实际使用中请详细对照原英文技术手册TB281 。如遇到问题请与 Promega 公司北京办事处联系，免费电话: 8008108133；E-mail: promega@ 技术手册号码：CTB099 第 1 页 共6 页 • 320µl dNTP 混合物, 10mM • 1.4ml 反转录10 X 缓冲液 • 1.2ml MgCl2 , 25mM • 13ml 无核酸酶的水 • 1 技术手册 储存条件：所有组分储存于-20 oC。 1. 本系统的有关问 III. 反转录操作方法 题，请与当地的 Promega 办事处或代 A. 反转录反应 理商联系。联系信息可 从以下方式获得： 反转录反应可以利用 Oligo(dT) 15 或随机引物随机引物引 导。如果需要由3 ’Poly(A) 区域引导，选用Oligo(dT) 15 引物； E-mail: 如果需要