小鼠受精卵一细胞期发育到二细胞期过程中蛋白激酶C对M期促进因子活性的影响.pdfVIP

精卵后测定了卵内蛋囱合成和簧白磷酸化的变化，结果表明蛋白 合成没有变他嚣蛋蠢磷酸毒{二发生了改变，支持了我们黪结论。 Eckberg等使用毛翼斑卵进行的研究也表明PKC的主臻磷酸化 底物可能包攒了MPF的两个甄基n…，均我们的实验结果一致。但 是PKC被激活后是怎样激活MPF迸谣弓l起缀胞分袭的，是直接 激活Cdc2还是激活Cdc25间接激活MPF，抑或是解除了抑制亚 基(CKI)鹣撩簇箨震?在我粕使臻PKC激瀑裁。矗G嚣舔鑫， MPF的活性并不是立即上升，而是经过～定时间后才开始上升， 这一现象提忝PKC激活后极餐可能是经过了一些闽接途径后最 终使MPF磷酸化激灞的。具体作用机制还有待予迸一劳的研究。 在PKC对MPF影响机制的研究上，谢限的几篇文章认为PKC 性[9】。因使用的实验材料即体绷胞和卵细胞差异较大，两种不同细 魏的细骢周期调控枫遐必然存在差别，有可能对这种绩果闽的矛 盾俸磁一定鬻释。PKC对MPF活性的影响杌嗣还有符予迸一步 论证。 小 绪 分剃对体内受精及体外受耩小鼠卵内MPF活性进行瓣定， 绘制时间曲线，表明MPF活性在进入分裂期前升高，在分裂期内 保持嵩僮，嚣凌骞舞分袈褰送入分裂阕褰时活整黪低，并森分裂阕 期保持低值。根据这一时间变化曲线，我们用PKC激活剂OAG、 PKC抑制剂璺形孢予索、佛渡懿TPA分别处理小鼠棼鲣受精卵， 在MPF活性离值酃分裂瓣前嚣观察并定时、定爨收集葳朔，测定 卵内MPF及PKC活性变化。结果表明PKC激滔剂OAG促进卵 裂，激活舞悫PKC，撵巍MPF潮k；PKC簿裁粥整形稳予素摔铜 卵裂，抑制卵内PKC活性，MPF活性降低；佛波醢TPA长时间 ·8。 作用抑制卵裂，使卵内PKC活性下调，MPF活性下降。表明PKC 森鼠郛一缨慈囊分袈过程中起关键侔用，PKC通过影l岛MPF活 性调控细胞周期进程。同时也直接证明了TPA长时间作用詹可 弓l起PKC活性下调。在使耀以上三种PKC活性调节剂的同Ij寸蒯 粥药物憔脱核剂裎一鹅膏蕈碱抑馘转漾，切断PKC对核基因转录 产生影响的可能憔后，同样测定卵内MPF活性来探讨PKC对 MPF熬撵鼷橇涮。结采表臻oAG鲶瑾磊赛凑MPF活性舞蹇，瑟 星形孢子索及TPA长时间处理后卵内MPF活性降低，药物性脱 拨剂的同时使用并没有改变PKC对MPF的影螅模式。表骥PKC 并菲通过影响转录，而极有可能是通过影响下游底物的蛋自磷酸 化过程对细胞周期进行调控的。总之，我们的结果明确表明在小鼠 受耩卵一续稳囊发弯弱二缨藏蘩遵程孛，PKC通过影璃MPF戆 活性来影响细胞周期进程，这种影响是通过翻译后修饰来实现的。 结 论 1。俸凑／俸终受精鼠翔炎MPF渗性在瑟将进入分裂絮懿并 始升高，在分裂期达到最高值并保持高活性，在离开分裂期进入分 裂间期对降低，在分裂阅期MPF活性保持低值。 2．在小鼠受精卵一细胞期发育戮二缏穗期过程中PKC通过 影响MPF活性影响细胞周期进程。 3。在夺藏受精羚早期发弯过程孛PKC对MPF黪影稠怒l疆 过翻译后修饰实现的。 关键斓：受精嬲；蛋白激酶℃；M期促进隧子v翻译后修馋 ·7· ABSTRACT IntrOd讧ction a have the For studies on overdecade，numerous proceeded effectsof kinase C)Oil control，some PKC(protein cell—cycle metwith of