第四章食品添加剂含量的检测.PDFVIP

第四章 食品添加剂含量的检测 实验一 苯甲酸、山梨酸含量的检测 Ⅰ、气相色谱法 一、目的与要求 1、了解气相色谱仪的基本原理及分析流程。 2 、掌握气相色谱分析法操作技术。 3、掌握外标法定量的方法。 二、原理 样品酸化后，用乙醚提取山梨酸、苯甲酸，经浓缩后，用附氢火焰离子化检测器的气相 色谱仪进行分离测定，用外标法与标准系列比较定量。 三、仪器与试剂 1、仪器 （1）气相色谱仪，带有氢火焰离子化检测器； （2 ）具塞量筒； （3 ）10mL 具塞刻度试管或 10 mL 容量瓶； （4 ）常用玻璃仪器； 2 、试剂： （1）乙醚：不含过氧化物。 （2 ）石油醚：沸程30～60℃。 （3 ）盐酸（1+1）： （4 ）石油醚－乙醚（3+1 ）混合液： （5 ）氯化钠酸性溶液（40g /L ）：于氯化钠溶液（40g /L ）中加少量盐酸（1+1）酸化。 （6 ）无水硫酸钠（分析纯）。 （7 ）苯甲酸、山梨酸标准贮备液： 精密称取苯甲酸、山梨酸各 0.2000g，置于 100mL 容量瓶中，用石油醚－乙醚（3+1 ） 混合溶剂溶解后并定容至刻度，混匀，此溶液每毫升相当于 2mg 苯甲酸或山梨酸。 （8 ）材料：饮料 四、测定步骤 1、样品的提取： 吸取 10.00mL 均匀饮料（如样品中含有二氧化碳，先加热除去），放入 150mL 分液漏斗中， 加 1：1 盐酸 2mL ，用 15、10mL 乙醚提取两次，每次振摇 1min，将上层醚提取液吸入另一 个 25mL 带塞量筒中，合并乙醚提取液。用 3mL 氯化钠酸性溶液（40g/L ）洗涤两次，静止 15min，用滴管将乙醚层通过无水硫酸钠滤入 25mL 容量瓶中。加乙醚至刻度，混匀。准确 吸取 5.0mL 乙醚提取液于 10mL 带塞离心管中，置 40 ℃的水浴上挥干,加入 2mL 石油醚-乙 醚(3+1)混合溶剂溶解残渣,密塞保存备用。 2 、色谱条件 （1）色谱柱：玻璃柱，内径3mm，长2m，内装涂以质量分数为 5 ％DEGS+1 ％H3PO4 固定 液的 60～80 目chromosorbWAW 。 （2 ）气体流速：载气为氮气，50mL/min （氮气和空气、氢气之比按各仪器型号不同选择各 自的最佳比例条件）。 （3 ）灵敏度：1000 （4 ）温度：进样口（气化温度）230 ℃；柱温 170℃；监测器230 ℃。 3、测定 （1）取6 支 10mL 容量瓶，编号，并按下表操作记录。 编号 1 2 3 4 5 6 试剂 取苯甲酸或山梨酸标准 0.25 0.5 0.75 1.00 1.25 溶液（mL ） 相当于苯甲酸或山梨酸 50 100 150 200 250 量（µg） 取样品乙醚提取液体积 2 (mL) 用石油醚定容（mL ） 10 10 10 10 10 10 进样量（µL） 2 2 2 2 2 2 测定峰高值 （2 ）以苯甲酸或山梨酸量（µg）为横坐标，与其对应的峰高值为纵坐标，绘制标准曲线。 （3 ）用样品测得峰高值与标准曲线比较定量。 五、结果计算 A ×1000 X= 5 V 2 m × × ×1000 25 V