啤酒酵母AS2.1416海藻糖合成酶基因tps1的cDNA克隆及序列的分析.pdfVIP

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啤酒酵母AS2.1416海藻糖合成酶基因tps1的cDNA克隆及序列的分析

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’()*!+(*# 年 月 $%%% !#$%%’()*$+,( .#(/%0$(,( ,- $%%% - 12 . !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 啤酒酵母 海藻糖合成酶基因 的 克隆及序列分析 !#$%%’ !#% ()*! 董志扬 段瑜侃 陈红漫 金 城 张树政 (中国科学院微生物研究所 北京 ) !%%%3% 关键词 海藻糖,磷酸海藻糖合成酶, 0 456 中图分类号 文献标识码 文章编号 ( ) 723 8 !%%%0#%!$%%%%#0%1%30%# 海藻糖( , , 9:;-)(=; !0)?@( :-B(=)0!0! !0C0)?@( :-0 A. . A. # 方 法 )是一种非还原性二糖,广泛存在于藻类、细菌、昆虫、无 B(=; 脊椎动物及酵母等许多生物体内。海藻糖除了作为一种储 #$% 啤酒酵母()*!文库的构建 存性碳源外,业已被证明在许多逆境,诸如高温、高盐、干旱、 将在#%Q培养的生长旺盛的啤酒酵母迅速转移到1%Q 重金属离子污染、冷冻、辐射等情况下,可以有效地保护生物 培养 ( ),提取其总 ,按照试剂盒的说明 $G;-LE(@R I6+8 [ ] 的细胞膜、蛋白质及核酸 ! 。 进行反转录。 与大肠杆菌噬菌体 连接,测定其 @C+8 #L0!! 海藻糖合成酶为一多酶体系。在酵母细胞中,其合成分 滴度,并在大肠杆菌 中扩增,提取 作为 反 GH)0%% C+8 456 为两步进行。第一步,在 磷酸海藻糖合成酶( )的作用 应的模板。 0 9 =! A 下,由 葡萄糖和葡萄糖 磷酸合成海藻糖 磷酸;第 基因的 扩增 #$# !#% +,- DC40 00 00 二步,在海藻糖磷酸酯酶( )的催化下,

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