兔出血症病毒衣壳蛋白VP60在杆状病毒表达系统中的表达及细胞内定位.pdfVIP

浙江农业学报ActsAgricldturaeZhejiangensis22(2)：135—139，2010 兔出血症病毒衣壳蛋白VP60在杆状病毒表达系统中的表 达及细胞内定位 陈 柳1，云 涛1，『，刘光清1，倪 征1，余 斌1，宋 毅L2 (1浙江省农业科学院农业部病毒学与生物技术重点实验室，浙江杭州310021；2浙江师范大学化学与生命科学学院，浙江金华 321004) 摘要：为了探讨兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白的细胞内定位，利用杆状病毒表达系统构建了表达RHDV 结构蛋白(vP60)的重组杆状病毒。间接免疫荧光(IFA)和Westernblot检测以及电子显微镜观察结果表明， VP60不仅能在昆虫细胞中正确表达，而且能自组装形成病毒样颗粒(VLPs)。进一步对表达蛋白进行细胞内 定位观察发现，表达蛋白定位于Sf9细胞的细胞膜上。 关键词：兔出血症病毒；结构蛋白；昆虫一杆状病毒表达系统；细胞内定位 中图分类号：$852．65 文献标识码：A 文章编号：1004—1524【2010)02—0135一05 and ofVP60 of localization Rabbit dis- Expression analysis protein hemorrhagic easevirusininsect cells-baculovin璐expressionsystem CHEN Yi’’2 Liul，YUNTa01…，LIU Binl，SONG Guang．qin91，NIZhen91，YU (1I研LaboratoryofHro如gyBiotechnologyofAgricultureMi蕊叼，Zhej赫ngAcademyAgriculturalSciences， of and Normal Hangzhou310021，China；2CollegeofChemistryLifeSciences，ZhejiangUniversity，．矗nhua321004，Ch／na) Abstract：ArecombinantbaeulovirusVP60ofRabbit disease constructed expressing hemorrhagicvirus(RHDV)was with bac-to—bacbaculovirus to the andintracellularlocalizationofthestructural expressionsystemstudyexpression VP60ofRHDVinSf9cells．TheresultsofindirectimmnuofluorescenceWesternblotanal— protein assay(IFA)and showedthatthe were inSf9eeHs．Theresul括ofelectron showed ysis proteinssuccessfullyexpressed mierographs that thereweresomevirus—like inSf9 furtherresultsofeonfocal indi— eels，and