小鼠输卵管卵母细胞的形态学研究.pdfVIP

维普资讯 第1口卷第3期 西北农韭大学学报 Vo1．18 No．3 1891年9月 AetaUalr．igrle．Boreali—oeeidenLalis SeDt． 1991 小鼠输卵管卵母细胞的形态学研究” 钱菊汾 王建辰 刘 灵 康竹梅 (西北农业大学兽匡系，陕西杨睦) 姚亚琴 蒋选利 (西北农业大学 中心实验室 ．陕西杨 睦) 摘 薹 应用光、电话技术研 究发现t新排卵母细胞 的纺锤体位于动物板质膜下，长轴 与 质膜平行，卵周隙狭窄，除纺锤体 区外，微绒毛 呈倒伏状遍布于卵细胞表面，皮质颗粒排 列 于质膜下，线粒体多分布于卵母细胞近中区亚染色体旁}排卵后2～4h，纺锤体在质膜下旋 转 90。，卵周嚏增宽，檄绒毛逐渐竖起．少数皮质颗粒提前外排，线粒体趋于分散，排卵后8h， 纺锤体 内移，微绒毛趋 于融合，皮质颗粒减少，线粒体退化。 关蕾调 卵体外受精，形态学，实验动物 ／小鼠，卵母细胞成熟 中圈分类号 $814．6，$865．130．3 1951年张明觉和Austin分别发现 的精子获能现象对体穸h受精的研究具有划时代的重 要意义。截至 目前，虽经体外受精获得的哺乳动物已有l0余种，而得到 “试管”后代的 数量较少，且种间差异大。其原因可能与卵母细胞在受精前未能得到充分成熟有关，或 者说卵母细胞象精子一样可能也存在一个 “获能 过程，值得探讨。 关于卵母细胞发育成熟的形态学研究，以往主要是描述在卵巢 内的变 化 一 ，在 输卵管内的变化，报道较少，且多研究的是卵子老化过程 。Fraser曾提出，在输卵 管内停留一定时间的小鼠卵母细胞，其受精、原核形成 、卵裂和 以后的发育速度均 比刚 排出的卵母细胞快 ” 。谭景和在研究小鼠卵母细胞酒精孤雌活化时也发现，只有 在 输 卵管内停留6h的卵子，其活化率最高 。这些结果表 明，小鼠卵子从卵巢排出进 入 输卵管后数小时内，还在经历一个充分成熟的过程，卵子只有达到充分成熟的阶段，才 能发生快速正常的受精 ，卵裂 以至胚胎进一步的发育。 排卵后卵母细胞充分成熟的超微结构变化， 目前尚没有完整的资科。本研究的 目的 在于揭示卵母细胞及其外被结构在充分成熟时的形态学标志，为体外受精提供理论和实 践依据。 l 材料与方法 试验动物 昆白小鼠48只，雌性，体重2O～22g，健康，由第四军医大学动 物 中心 提供 。 文蔫 收鑫 日期-1~90-06I27． 1)高等学校博士点基 叠资助项 目。 2)89届奉科 毕业生。 维普资讯 第 8期 钱菊扮等t小 鼠输卵瞥卵母细胞 的形态学研究 23 — — — — 一 一 — — — — — — — — — — — — — — — 一 试 剂 PMSG (长春生物 制 品研究所，批号871—1)，LH (宁波市激素制品厂，、批 号890304)，透职质酸酶 (Sigma，批号115F-8165)，链霉蛋白酶 (Merck，批号143008)。 超排 每 只 小鼠腹腔注射10iuPMSG，48h后，腹腔注射 5iuLH。注入LH后分 别=1=12，14，15，16，20，24】1回收输卵苫卵丘一卵母细胞复合体。 扫描 电镜 (SEM)样本制作 将形 态 正 常 的卵丘一卵母细胞复合 体，用 0．1％透 明 质酸酶脱去卵丘细胞，其中部分再 以0． 链霉蛋 白酶去掉透 明带，3％戊二醛固定，粘 于涂有3％聚乙烯醇缩 甲酸鲍滤纸片上，l 锇酸后固定，乙醇逐级脱水，乙酸异戊脂置 换。COt临界点干燥．镀膜后，s 。型SEM观察。 透射 电镜 (TEM)样本制作 卵丘一卵母细 胞固定后 ，Ep