第五章-生长与繁殖.pptVIP

在微生物发酵工业中，如果有较长的延迟期，则会导致发酵设备的利用率降低、能水耗增加、产品生产成本上升，最终造成劳动生产力低下与经济效益下降。只有缩短延滞期才有可能缩短发酵周期，提高经济效益。因此深入了解延滞期的形成机制，可为缩短或延长延滞期提供指导实践的理论基础，这对于工业、农业、医学、环境微生物学及其应用等均有极为重要的意义。 因此，在微生物应用实践中，通常可采取用处于快速生长繁殖中的健壮菌种细胞接种、适当增加接种量、采用营养丰富的培养基、培养种子与下一步培养用的两种培养基的营养养成分以及培养的其它理化条件尽可能保持一致等措施，可以有效地缩短延滞期。 处于对数生长期的细胞，由于代谢旺盛，生长迅速，代时稳定，个体形态、化学组成和生理特性等均较一致，因此，在微生物发酵生产中，常用对数期的菌体作种子，它可以缩短延迟期，从而缩短发酵周期，提高劳动生产率与经济效益。 对数生长期的细胞也是研究微生物生长代谢与遗传调控等生物学基本特性的极好材料。 特点： 1）生长速度为零，新生=死亡，达到动态平衡； 2）活菌数的总量达到最大值； 3）胞内的储藏物开始形成（如肝糖粒、脂肪粒等）； 4）某些芽孢菌的芽孢开始形成； 5）某些细菌过量积累次级代谢产物，如抗生素、维生素等。 稳定生长期时活菌数达到最高水平，如果为了获得大量活菌体，就应在此阶段收获。在稳定期，代谢产物的积累开始增多，逐渐趋向高峰。某些产抗生素的微生物，在稳定期后期时大量形成抗生素。 稳定期的长短与菌种和外界环境条件有关。生产上常常通过补料，调节 pH ，调整温度等措施来延长稳定生长期，以积累更多的代谢产物。 4.衰亡期（Death phase） 微生物的生长曲线，反映一种微生物在一定的生活环境中 ( 如试管、摇瓶、发酵罐 ) 生长繁殖和死亡的规律。它既可作为营养物和环境因素对生长繁殖影响的理论研究指标，也可用为调控微生物生长代谢的依据，以指导微生物生产实践。 根据发酵目的的不同，确定在微生物发酵的不同时期进行收获。微生物生长曲线可以用于指导微生物发酵工程中的工艺条件优化以获得最大的经济效益。 富集培养 有些微生物在自然界中生存着，但分离和获得纯培养却十分困难，有些甚至至今没有成功过。对于这些微生物采取富集培养的方法，作为纯培养的前处理，或者直接以富集培养物为研究材料。 富集培养用作为取得纯培养的前处理，使特定的微生物种类在数量上占绝对优势，然后稀释培养在适宜平板培养基上，长出的单菌落多数是预期要分离的特定种类。 二元培养 二元培养是纯培养的一种特殊形式。有些寄生微生物只能在寄主微生物体内寄生，必需将寄生微生物和寄主微生物培养在—起，同时排除其他杂菌。例如噬菌体只能在特定的寄主微生物体内繁殖。首先在平板培养基中繁殖寄主微生物的纯培养 ( 称为细菌坪 ) ，再将含噬菌体的稀释液接种在细菌坪上，经过培养，在细菌坪上出现许多独立的噬菌斑，反复纯化，得到纯的二元培养体即只有一种寄主细菌和一种噬菌体的“纯培养”。 恒化器法(Chemostat)： 指控制恒定的流速，使由于细菌生长而耗去的营养物质及时得到补充，培养基中营养物浓度基本恒定，从而保持细菌的恒定生长速率。 恒化连续培养往往控制微生物在低于最高生长速率的条件下生长繁殖。恒化连续培养在研究微生物利用某种底物进行代谢的规律方面被广泛采用。因此，它是微生物营养、生长、繁殖、代谢和基因表达与调控等基础与应用基础研究的重要技术手段。 分批培养与连续培养的比较 湿热比干热灭菌更好： 1）更易于传递热量； 2）更易破坏保持蛋白质稳定性的氢键等结构； 三、湿度、渗透压和水活度 专性好氧菌 （ obligate or strict aerobes ）这类微生物具有完整的呼吸链，以分子氧作为最终电子受体，只能在较高浓度分子氧（一 0.2Pa ）的条件下才能生长，大多数细菌、放线菌和真菌是专性好氧菌。 兼性厌氧菌 (facultative anaerobes ） 兼性厌氧菌也称兼性好氧菌（ facultative aerobes ）。这类 微生物的适应范围广，在有氧或无氧的环境中均能生长。 一般以有氧生长为主，有氧时靠呼吸产能；兼具厌氧生长能力，无氧时通过发酵或无氧呼吸产能。如大肠杆菌（ E . coli ）、产气肠杆菌（ Enterobacter aerogenes ）等肠杆菌科 ( Enterobacteriaceae ）的成员，地衣芽孢杆菌（ Bacillus lichenifornus ）、酿酒酵母（ Saccharomyces cerevisiae ）等 微好氧菌 （ microserophilic bact