中药清肠败毒饮对溃疡性结肠炎模型大鼠NF—κB和TXB-%2c2-的影响.pdfVIP

山两医科人学硕l二学位论文 刖 舌 溃疡性结肠炎(UlcerativeColitis，UC)是一种原因不明的慢性非特异性炎症，主要累 及直肠粘膜、乙状结肠粘膜，也可逆行向上扩展至左半结肠、右半结肠，甚至全结肠和末 端回肠。其临床主要表现为腹泻、大便脓血或粘液、腹痛、里急后重。本病病情复杂，病 程长，迁延难愈，已被世界卫生组织列为现代难治性疾病之一。该病在西方国家相当常见， 我国通过多中心回顾性调查近14年溃疡性结肠炎病例，显示我国溃疡性结肠炎发病正呈 逐年上升趋势【l】。目前溃疡性结肠炎的治疗仍是临床上的一大难题。西药主要以柳氮磺胺 吡啶(SASP)及其衍生物和糖皮质激素等免疫抑制剂为主，但这些方法只能暂时控制病情， 疗效不巩固、容易复发且副作用多，故寻求安全有效的治疗方法就是当务之急。 然而对于溃疡性结肠炎病因和发病机制的研究，尚未明确。目前大多数学者认为本病 是由多因素相互作用所致，主要与免疫、遗传、感染、环境、精神等因素有关。溃疡性结 肠炎的发病机制普遍认为是多因素作用于遗传易感人群，使之免疫反应亢进，造成自身免 疫、体液免疫、细胞免疫等多种免疫功能异常，以及各种细胞活化、多种炎性介质分泌所 产生的综和效应。随着免疫学、遗传学、分子生物学等学科的迅速发展，以及动物模型制 作方法的同趋成熟，尤其近年来对细胞因子、黏附因子、核因子r,B(NF—lcB)、血栓素 的研究，正逐步揭示溃疡性结肠炎的发病机制，并已经为或将为开发新的治疗途径提供理 论依据。 溃疡性结肠炎属西医病名，据其临床表现可归属于祖国医学“痢疾”、“泄泻一、“肠 潞”、“下利”等范畴。本病发作期以湿热为主，多种致病因素作用于机体，导致运化失 司，湿热蕴结，肠络受损，血败肉腐，最终内溃成疡。中药复方清肠败毒饮是导师在长期 的临床实践基础上总结出来的效方，临床实践证明，该方在治疗溃疡性结肠炎，延缓复发 时间，提高患者生存质量，避免不良反应或毒副作用出现方面，皆取得了满意的成效，充 分显示出中医药治疗本病的优越性，值得临床推广。 本课题通过采用三硝基苯磺酸致溃疡性结肠炎大鼠模型，观察清肠败毒饮对溃疡性结 肠炎模型大鼠结肠病理形态以及结肠组织NF一1cB、血浆TXB2表达的影响，旨在探讨清肠 败毒饮治疗溃疡性结肠炎可能的作用OL铝JJ和作用靶点，为进一步的深入研究溃疡性结肠炎 发病机制奠定基础，为临床治疗提供更多的理论和实验依据。 山两医科人学硕j：学位论文 材料与方法 1动物的选择与分组 清洁级)，实验过程中对动物的饲养及取材均遵守实验动物管理与保护的有关规定。 大鼠40只，常规适应性饲养3天，随机分为4组：正常对照组(A组)、模型组(B 组)、柳氮磺胺吡啶治疗组(C组)、中药清肠败毒饮治疗组(D组)，每组10只。 2药物制备 中药清肠败毒饮：由白头翁、黄连、仙鹤草、桔梗、惹苡仁等组成，上药按比例称取 后，煎制浓缩为含生药1．Sg／ml的合剂(山西医科大学第二医院中药制剂室制备) 柳氮磺胺吡啶：O．25克／片，批号060902，山西三九同达药业有限公司 3主要试剂 抗NF．rd3单克隆抗体及SP免疫组化试剂盒 北京中杉金桥生物技术有限公司 125l一血栓烷B2放免试剂盒 北京普尔伟业生物科技有限公司 5％2,4，6硝基苯磺酸(TNBs)Sigma公司； 无水乙醇 上海国药集团 HE染色剂 临用前配制 戊巴比妥钠 临用前配制 PBS(磷酸盐缓冲盐水) 临用前配制 4主要仪器 冷冻离心机 上海安亭科学仪器厂 石蜡切片机 德国Leica公司 恒温孵育