血管紧张素(1-7)对大鼠肾小球硬化的保护作用及其机制研究.pdf

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复旦大学博士研究生论文 [中图分类号]:R5 第二部分 II诱导系膜细胞纤连蛋白表达的影响 Ang(1.7)对Ang 目的: Ang(1—7)在肾小球固有细胞如系膜细胞中抗纤维化作用尚不明确。本研究拟 II诱导系膜细胞FN的表达及其具体机制。 观察Ang(1.7)对抗Ang 方法: 1. II诱 体外培养小鼠系膜细胞,应用Westernblot方法观察Ang(1—7)处理Ang 情况。 2. 体外培养小鼠系膜细胞,细胞生长融合至50%时,向6孔板中分别转入500 nM Mas特异性干扰RNA(Mas II和DX.600,应用Westernblot和Real.timePCR方法检测FN的表达 Ang 的情况。 siRNA和 3.体外培养小鼠系膜细胞,应用免疫共沉淀法观察细胞转染Vehicle MassiRNA后,ATl和Mas的表达情况以及曲者相互关系。 结果: II诱导系膜细胞FN蛋白表达增…::。N,AIl向。 1.Ang(1—7)对Ang 2.Mas II诱导细胞FN的表达(P0.05)。 Ang 11的情况下,Ang(1—7)本身较对照组FN表达无著异,而阻 3.在无外源性Ang 断ATI后,Ang(1-7)湿著减少FN的表达(JD0.05)。 4.ATI与Mas之f叫可形成复合物的中问状态。 结论: 在兀外源性AngII的情况下,Ang(1—7)拮抗AngII诱导FN表达,而Ang(1—7) 11诱导系膜细胞FN表达增多无影响,。。j能与两者受体之间形成 对外源性Ang A111一Mas复合物中间状态的解离有关。 关键词: 系膜细胞;Ang(1-7);Mas受体;ATI受体 [中图分类号].R5 4 万方数据 复旦大学博士研究生论义 第三部分 Ang(1.7)对肾小球血管生成素.Tie一2系统的影响及机制研究 目的: 血管生成素.Tie。2系统为肾小球固有细胞(内皮细胞,足细胞)特有的血管 生成系统之一。Ang(1-7)具有抑制血管生成的作用,而此效应在肾小球细胞中未 见报道。本研究拟观察Ang(1—7)对肾小球血管生成素一Tie-2系统的影响及其可能 机制。 方法: 1.体外培养小鼠肾内皮细胞,运用Matrigel凝胶法观察内皮细胞管腔形成能力。 2.体外培养小鼠足细胞和内皮细胞,运用Real—time PCR法检测不同剂量Ang (1—7)或AngII对足细胞表达Ang-1和内皮细胞表达Ang一2的影响。 II的情况下,根据不 3.体外培养小鼠足细胞和内皮细胞,在无或有外源性Ang 阻断剂PD98059,运用Western 以及eNOS磷酸化、ERKl/2磷酸化水平。 结果: 1.在兀外源。I生Ang 达。在有外源4I-

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