12-脂氧合酶对胃癌细胞AGS增殖与凋亡的影响.pdfVIP

前 言 胃癌是消化系统常见的恶性肿瘤之一，其发病机理迄今尚未阐明。在世界 范围内，胃癌的发病率仅次于肺癌，占居第二位…。近年来，我国某些地区胃癌 的发病率虽有下降趋势，但总体而言，胃癌死亡率仍居高不下，每年死于胃癌的 患者达16万人，占全部恶性肿瘤死亡人数的23％”’，由此可见，胃癌已严重影响 到我国及世界人民的生命健康，为此，积极探索胃癌的发病机理对胃癌的防治有 着极其重要的意义。 花生四烯酸(arachidonicacid，AA)，化学名称为5，8，ll，14一二十 碳四烯酸，含有20个碳原予，4个不饱和键，属于n一6系列的长链多不饱和脂 肪酸(PUFA)，简记为20：4(n-6)。人们从研究爱斯基摩人心血管疾病发病率 低的现象中了解到，PUFA可以防止胆固醇在动脉血管壁上沉积，能预防心血管 疾病的发生，从此开始对PUFA与疾病以及亚健康人群之间关系的研究，AA的生 理及病理活性也逐渐被人们所认识。AA是人体的一种必需脂肪酸，它在生物体 内主要以磷脂的形式存在于细胞膜上，在磷脂酶A2和磷脂酶C的作用下分解生 成游离的从。目前己发现AA可经三条途径进行代谢。1，一是环氧合酶途径，其 酶途径，其代谢产物主要为羟基二十碳四烯酸(HETEs)和白三烯(LTs)；三是 细胞色素P450单氧合酶途径，其代谢产物为多种环氧化物(epoxides)，同时也 产生HETEs等。 AA及其代谢衍生物具有很强的生物活性，在许多疾病的病理生理过程中起 着重要的作用“3。近年来AA在肿瘤中的研究倍受关注，大量研究表明，花生四 烯酸环氧合酶代谢产物与多种肿瘤的发生、发展及侵袭、转移密切相关”“…，基 础研究发现COX一2抑制剂可抑制结直肠肿瘤的发生“””1，流行病学调查研究发现 COX一2抑制剂可以显著降低大肠癌、大肠腺瘤的发病率“””3，临床研究办显示 COX一2抑制剂有治疗结直肠肿瘤的作用““。然而，目前关于花生四烯酸脂氧合酶 代谢途径与肿瘤的研究仍较罕见，已知LOX主要有5，8，12，15一LOX等亚型， 其中15一LOX有抑癌功能而5，12哑型则被证实具有促癌作用。12一1．0x又因首次 被发现的细胞不同分为：血小板型，白细胞型和表皮型““，其中血小板型12一l。Ox 及其催化产物12-HETE与肿瘤关系较为密切，陆续发现并证实在前列腺癌、乳腺 癌、肺癌、结肠癌及胰腺癌中均存在12一LOX的过度表达“””1，其抑制剂能抑制 肿瘤细胞增殖并诱导细胞凋亡，而其产物则具有相反的作用。然而关于12一LOX 对胃癌细胞AGS增殖与凋亡的影响及其信号转导机制的研究仍少有报道。 制胃癌细胞AGs增殖及诱导胃癌细胞凋亡的作用，且该作用可以被其产物12一HETE 所逆转。…，但关于其外源性产物12一HETE对胃癌细胞增殖与凋亡的系统研究却未 见报道，关于12一LOX与胃癌的研究办很罕见，为此本实验拟在体外培养胃癌细 AGS增殖与凋亡的影响，为进一步研究12-LOX介导的胃癌细胞增殖与凋亡的信号 传导途径奠定理论基础，为阐明胃癌的发病机理提供一个新的理论依据，也为寻 求新的胃癌化疗药物提供潜在的理论依据。 材料与方法 材料 1、实验细胞株 人胃癌细胞株AGS购自中国科学院上海细胞生物研究所。 2、主要仪器 cO：培养箱(2300型) 美国Sheldon公司 净化工作台(SW-CJ—IFD型) 中国苏州安泰空气技术有限公司 相差显微镜(CK2型) 日本OLYMPUS公司 Beckman离心机(JM一6型) 美国Beckman公司 高速冷冻离心机(TGL-16G-A型) 中国上海安亭科学仪器厂 酶标仪(ELX800型) 美国宝特公司 荧光显微镜(TE2000一U型) 同本Nikon公司 PCR仪(2400型) 美国PF公司 稳