色素上皮衍生因子对黑素细胞生物学活性的影响.pdf

中文摘要 目的 应用小干扰RNA(sil冰A)干扰人黑素细胞的色素上皮衍生因子(PEDF) 基因的表达，了解PEDF基因对黑素细胞增殖的作用。 ■ 方法 将PEDF 荧光定量RT-PCR和蛋白印迹法检测细胞PEDFmRNA和蛋白的表达，MTT法检测 干扰后细胞的增殖水平。 结果 转染后黑素细胞的PEDF mRNA与蛋白表达明显减弱(P0．001)。黑素细胞增殖 率在转染后显著升高(P0．001)。 结论 黑素细胞的过度增殖有抑制作用。 l关键词lRNA干扰；色素上皮衍生因子；恶性黑素瘤 中图分类号：R75 第三部分人恶性黑素瘤细胞株中色素上皮衍生因子基因的突变研究 目的 探讨色素上皮衍生因子(PEDF)基因在恶性黑素瘤细胞系中的突变状况。 方法 采用聚合酶链反应一单链构象多态性分析(PCR-SSCP)对人恶性黑素瘤细 胞株A375中PEDF基因的所有八个外显子进行突变检测。对SSCP分析有异常 泳动条带样本的PCR产物进行DNA测序。 结果 恶性黑色素瘤细胞株A375与正常黑素细胞相比，第3到第7外显子都出现 4 中文摘要 了DNA泳动变位，其中以外显子5，6最为明显。PEDF基因第5，6外显子均存 在突变：第5外显子的突变类型以单个碱基的缺失为主，第6外显子的突变类型 则以单个碱基的突变为主。 ● 结论 PEDF基因的突变可能在恶性黑素瘤的发病中起一定作用。 【关键词l黑素瘤；色素上皮衍生因子；基因突变 中图分类号：R75 5 英文摘要 human factoron Effectof derived epithelium pigment melanocytes Abstract FactorInHuman PartI of Derived Epithelium Pigment Expression Tissues CellsAnd and Melanoma