全反式维甲酸对ANGⅡ诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖及胶原蛋白分泌的影响和机制的研究.pdfVIP

前 言 心肌肥大与重构主要是心脏对血流动力超负荷的一种适应性反应，也是多种 心血管疾病的主要病理机制， 如高血压、心衰、心肌梗死。在整体水平上，心 肌重构主要表现为心脏的大小、形状等的变化，而在组织病理学上则表现为正常 的室壁结构的改变，主要是心肌细胞肥大，心脏成纤维细胞增殖，心肌纤维化， 并可导致细胞死亡。心室壁结构的重构是临床心脏疾病的一个重要表现，涉及到 心肌间质蛋白的生成和降解；细胞的增殖与迁移；细胞的凋亡和坏死等过程。在 这些过程中，心脏成纤维细胞的增殖和功能活动改变起着重要的作用。心脏成纤 维细胞可以生成多种细胞生长因子和细胞因子，以及细胞间质蛋白和蛋白酶，且 自身也会发生形态及功能上的改变，使心肌发生重构及纤维化。心肌纤维化可分 为两类：修复性纤维化和反应性纤维化，两者的差别在于前者可伴随细胞的死亡； 而后者主要是表现为细胞间质或血管周纤维化，但并不直接引起细胞的死亡。纤 维化主要是由于细胞间质中的蛋白合成增多和(或)降解减少所导致。心肌纤维 化是心肌重构的一个重要特征，表现为纤维性胶原蛋白不成比例的过多堆积，导 致心室壁的僵硬，影响其收缩功能，减少毛细血管的密度并增加氧的扩散距离， 导致心肌细胞缺氧，心功能下降。心肌间质中的蛋白主要是I型和Ⅲ型胶原蛋白， 此外也有Ⅳ型、V型、Ⅵ型胶原蛋白及弹性蛋白。在正常生理条件下，这些蛋白 构成纤维蛋白网，连接相邻的心肌细胞，确保其结构的整体性，维持心脏的正常 结构及功能。 心脏成纤维细胞是心脏中胶原蛋白的主要来源；同时，心脏成纤维细胞也分 泌胶原酶(删P)，使胶原蛋白降解。当二者之间的比例失调时，胶原蛋白的生成 多于降解，就会出现心肌肥大和纤维化，进而发生心肌重构导致慢性心衰。体液 中有多种体液因子可以影响心脏成纤维细胞的表型及功能，例如，血管紧张素II (AngII)、成纤维细胞生长因子(bFGF／FGF一2)、转化生长因子一B t(TGF一131) 够诱导心脏成纤维细胞增殖，促进其对细胞间质蛋白的合成与分泌，及其受体的 表达。 II的很多生理效 AngII有两种G蛋白耦联的膜受体：ATl和AT2受体，Ang 应主要是通过ATl受体介导的。当AngII与心脏成纤维细胞上的ATI受体结合 成纤维细胞分泌多种细胞因子作用于心肌细胞及其自身，如内皮素(ET-1)、转 7 化生长因子(TGF铂)、肿瘤坏死因子(n师．a)等，其中TGF．角在促进心脏成 纤维细胞对胶原蛋白的分泌方面有重要的作用。有报道显示，在正常的大鼠的心 脏中，TGF．IBI、I型胶原蛋白和III型胶原蛋白的表达都很低，而在心肌梗塞后 的心脏中，TGF铂的表达明显增多；之后，I型胶原蛋白和HI型胶原蛋白的表 达也显著增加。在体外培养的心肌成纤维细胞中，TCF-p。也可以诱导细胞间质 蛋白的生成，而灌注AngII后的大鼠，可以在其心脏成纤维细胞中发现TGF确 II可以通过调节TGF．卢1，进而影响心 和I、IⅡ型胶原蛋白的增加。这表明Ang 肌的纤维化及心肌重构。 关于AnglI作为一种重要的因子参与心肌肥大和重构的其他证据有：1)给 正常大鼠持续灌注AngII，两天后心脏成纤维细胞可以增加数倍，这些作用可被 的堆积和DNA的合成；3)在心肌梗塞病人中给予ACEI治疗可以预防心脏增大。 II对于心脏的直接效应包括：调节钠、氢、钙的转运；刺激蛋白的合成； Ang 促进葡萄糖的摄取与利用等。同时很多研究表明，AngⅡ诱导的心肌肥大及重 构的过程也是从终末分化的“成年心肌表型”向“胚胎心肌表型”转化的一个“去 分化”过程。因此，我们希望找到一些具有诱导分化作用的药物，观察它们是否 能抑制心脏成纤维细胞的增殖和胶原蛋白的分泌，从而可以缓解心肌的纤维化， 用于防治心肌重构。 维甲酸是维生素A的衍生物，具有多种生物学效应。总体说来，其作用是 抑制细胞增殖和促进分化。全反式维甲酸(atRA)是维甲酸的一种，也是目前 最常用的诱导分化剂之一，在临床上主要用于治疗白血病等恶性肿瘤及一些表皮 增生性皮肤病。在体外实验中，atRA还可以抑制造血、消化、呼吸、神经以及 生殖等各系