植物生理学实验方法指南.pdf

植物生理学实验方法指南植物生理学实验方法指南 植物生理学实验方法指南植物生理学实验方法指南 实验实验 01 植物组织中自由水和束缚水含量的测定植物组织中自由水和束缚水含量的测定 实验实验 植物组织中自由水和束缚水含量的测定植物组织中自由水和束缚水含量的测定 植物组织中的水分以自由水和束缚水两种不同的状态存在。自由水与束缚水含量的高低与植 物的生长及抗性有密切关系。自由水／束缚水比值高时，植物组织或器官的代谢活动旺盛，生长 也较快，抗逆性较弱；反之，则生长较缓慢，但抗性较强。因此，自由水和束缚水的相对含量可 以作为植物组织代谢活动及抗逆性强弱的重要指标。 一、原理: 自由水未被细胞原生质胶体颗粒吸附而可以自由移动、蒸发和结冰，也可以作为溶剂。束缚 水则被细胞原生质胶体颗粒吸附而不易移动，因而不易被夺取，也不能作为溶剂。基于上述特点 以及水分依据水势差而移动的原理，将植物组织浸入高浓度 （低水势）的糖溶液中一定时间后， 自由水可全部扩散到糖液中，组织中便留下束缚水。自由水扩散到糖液后 （相当于增加了溶液中 溶剂）便增加了糖液的重量，同时降低了糖液的浓度。测定此降低了的糖液的浓度，再根据原先 已知的高浓度糖液的浓度及重量，可求出浓度降低了的糖液的重量。用浓度降低了的糖液的重量 减去原来高浓度糖液的重量即为植物组织中的自由水的量 （即扩散到高浓度糖液中的水的量）。 最后，用同样的植物组织的总含水量减去此自由水的含量即是植物组织中束缚水的含量。 二、材料、仪器设备及试剂 （一）材料：小白菜、棉花叶片。 （二）仪器设备：1.阿贝折射仪；2.分析天平或电子顶载天平 （感量0.1mg ）；3.烘箱；4.干燥器； 5.称量瓶；6.打孔器 （面积0.5cm2 左右）；7.烧杯；8.瓷盘；9.托盘天平 （1/100g）；10.量筒。 （三）试剂：重量百分浓度为 60 ％～65 ％的蔗糖溶液：用托盘天平称取蔗糖60～65g，置烧杯中， 加蒸馏水 40～35g，使溶液总重量为 100g，溶解后备用。 三、实验步骤 1.植物组织中总含水量的测定 （1）取称量瓶3 只（三次重复，下同），依次编号并分别准确称重。（2 ）在田间选取生长一致的 待测的植物数株，各选部位、长势、叶龄一致的有代表性叶子数片。用打孔器钻取小圆片 150 片（注意避开粗大的叶脉），立即装到上述称量瓶中 （每瓶随机装入50 片），盖紧瓶盖并精确称 重。（3 ）将称量瓶连同小圆片置烘箱中 105℃下烘 15min 以杀死植物组织细胞，再于 80～90℃下 烘至恒重 （称重时须置干燥器中，待冷却后称）。设称量瓶重量为 W1 ，称量瓶与小圆片的重量 为 W2 ，称量瓶与烘干的小圆片的重量为W3 （以上重量单位均设为g，下同）。则植物组织的总 含水量 （％）可按下式计算 植物组织的总含水量 （％）＝（W2 －W3 ）/ （W2 －W1 ）×100 根据上式可分别求出三次重复所得到的组织总含水量的值并进一步求出其平均值。 2.植物组织中自由水含量的测定 （1）另取称量瓶 3 只，编号并分别准确称重。（2 ）用打孔器打 取小叶圆片 150 片（植物材料的选取同上），立即随机装入三个称量瓶中 （每瓶装50 片），盖紧 瓶盖并立即称重。（3 ）三个称量瓶中各加入60 ％～65 ％的蔗糖溶液5ml 左右，再分别准确称重。 （4 ）各瓶于暗处置4～6h （经减压处理后，只需在暗处置 1h），其间不时轻轻摇动。到预定的时 间后，充分摇动溶液。用阿贝折射仪 （见附注）分别测定各瓶糖液浓度，同时测定原来的糖液浓 度。设称量瓶重量为 W1 ，称量瓶与小圆片的重量为W2 ，称量瓶与小圆片及糖液的重量为W4 ， 糖液原来的浓度为 C1，浸过植物组织后的糖液的浓度为C2 。则植物组织中自由水的含量 （％） 可由下式算出： 植物组织中自由水的含量 （％）＝（W4 －W2 ）×（C1－C2 ）/[(W2 －W1) ×C2] ×100 根据上式同样可求出三个不同的测定值并进一步求出其平均值。 3.植物组织中束缚水含量的计算 植物组织中束缚水的含量 （％）＝组织总含水量 （％）－组织中 自由水含量 （％） 实验实验 02 植物组织水势的测定植物组织水势的测定 （小液流法（小液流法）） 实验实验 植物组织水势的测定植物组织水势的测定 （（小液流法小液流法）） 一、 原理 将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中，当找到某一浓度的溶液与植物组织之间水分 保持动