乙醇鉴定技术规范.DOC

目 次 前言 I 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 原理 1 4 试剂和材料 1 5 仪器 1 6 测定步骤 2 7 结果计算 3 附录A （资料性附录） 乙醇对照品和内标气相色谱图 4 附录B （资料性附录） 校准曲线 5 前 言 本技术规范按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本技术规范的附录A和附录B为资料性附录。 本技术规范由司法部司法鉴定科学技术研究所提出。 本技术规范由司法部司法鉴定管理局归口。 本技术规范起草单位：司法部司法鉴定科学技术研究所。 本技术规范主要起草人：卓先义、刘伟、向平、沈保华、卜俊、马栋、严慧。 本技术规范所代替规范的历次版本发布情况为：SF/Z JD0107001——2010。血液中乙醇的测定 顶空气相色谱法 范围 本技术规范规定了血液中乙醇的顶空气相色谱测定方法。 本技术规范适用于血液中乙醇的定性及定量分析。 本技术规范的方法检出限为0.01mg/mL；定量下限为0.05mg/mL。 规范性引用文件 下列文件对于本技术规范的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本技术规范。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本技术规范。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法（GB/T 6682-2008，ISO 3696：1987，MOD） GA/T 122 毒物分析名词术语 原理 本法利用乙醇的易挥发性，以叔丁醇为内标，用顶空气相色谱火焰离子化检测器进行检测，经与平行操作的乙醇对照品比较，以保留时间进行定性分析；以峰面积为依据，用内标法定量。 试剂和材料 除另有说明外，水为GB/T 6682规定的二级水。 乙醇 色谱纯。 乙醇标准溶液 精密称取适量乙醇，用水配成10.0mg/mL乙醇标准储备溶液。储备液在冰箱中冷藏密闭保存，有效期为6个月。试验中所用其它浓度的标准溶液均从上述储备液稀释而得，在冰箱中冷藏密闭保存，有效期为3个月。 叔丁醇 色谱纯。 叔丁醇溶液 精密称取适量叔丁醇，用水配成5.0mg/mL叔丁醇储备液。储备液在冰箱中冷藏密闭保存，有效期为12个月。将储备液用水稀释，得40.0μg/mL叔丁醇内标工作液，在冰箱中冷藏密闭保存，有效期为6个月。 仪器 气相色谱仪 配火焰离子化检测器（FID）。 顶空进样器 配1mL定量进样环。 样品瓶 10mL，顶空自动进样器用。 硅橡胶垫 铝帽 密封钳 精密移液器 自动稀释仪 测定步骤 样品处理 用精密移液器或自动稀释仪取待测血液0.10 mL及0.50 mL 40.0μg/mL 叔丁醇内标工作液，加入样品瓶内，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀。 测定 顶空气相色谱测定参考条件 a） 色谱柱（1）：DB-ALC1（30m(0.32mm(1.8(m）石英毛细管柱或相当者； 柱温：恒温40(C； 色谱柱（2）：DB-ALC2（30m(0.32mm(1.2(m）石英毛细管柱或相当者； 柱温：恒温40(C； b） 载气：氮气，纯度≥99.999%，流速8mL/min； c） 进样口温度：150(C； d） 检测器温度：250(C； e） 加热箱温度：65(C； f） 定量环温度：105(C； g） 传输线温度：110(C； h） 气相循环时间：3.5min； i） 样品瓶加热平衡时间：10.0min； j） 样品瓶加压时间：0.10min； k） 定量环充满时间：0.10min； l） 定量环平衡时间：0.05min； m） 进样时间：1.00min。 定性测定 样品溶液按照顶空气相色谱测定条件测定，以叔丁醇为内标，记录色谱峰的保留时间。将待测样品色谱峰的保留时间与乙醇标准对照品的保留时间比较，相对误差在(2%内，空白对照样品内标物色谱峰正常而无乙醇的色谱峰，一般可以认为待测样品中含有乙醇；必要时，选择不同的色谱条件或用气相色谱-质谱法确证。如果内标物色谱峰正常，而无乙醇的色谱峰时，可认为检验结果为阴性。乙醇对照品和内标气相色谱图，参见附录A。 定量测定 本方法采用内标法－校准曲线法或内标法－单点校正法定量测定。 6.2.3.1 内标法－校准曲线法 采用内标-校准曲线法测定（见附录B）。将乙醇对照品溶液进样，以乙醇和内标峰面积比为纵坐标，乙醇对照品工作溶液浓度为横坐标绘制标准曲线，用标准曲线对待测样品进行定量，所测样品中乙醇的浓度值应在线性范围内。 6.2.3.2 内标法－单点校正法 待测血液样品乙醇浓度在标准溶液浓度的±30%内可用单点法定量。 平行试验 按以上步骤对同一待测样品进行平行试验。 单柱单检测器两份样品测定结果按两份样品的平均值计算，双样相对相差不得超过10％（有凝血块的血样不超过15％）。双样相对相差按式（1）计算：