第3.3章 基因的体外重组与转化-徐飞.pdf

每周要闻 陆地棉基因组解析研究获新进展 陆地棉 （AD基因组）原产于中美 洲，是世界上种植面积最广、产 量最大的栽培棉。陆地棉是在 100万至200万年前由亚洲棉 （A 基因组）和雷蒙德氏棉 （D基因 组）杂交和染色体加倍而形成的。 一直以来，由于陆地棉缺乏高质 量的参考基因组，关于棉纤维伸 长的分子机制和作物育种方面的 研究进展缓慢。 最近，朱玉贤与中国工程院院士、中国农科院棉花研究所所 长喻树讯、深圳华大基因组学研究所合作解析了全长2173兆 碱基对的陆地棉基因组，其中包含7万多个蛋白编码基因， 基因组大部分序列由转座子组成。 上期回顾 1、噬菌体载体的特点 COS位点 选择性标记少 优 连接大片段 缺 点 外源DNA 点 基因转移效 需要体外包装 率高 Cosmid （柯斯质粒） 2、人工染色体载体 端粒 缺素筛选 酵母人工染色体 着丝粒 YAC Ori 3.3 基因的体外重组与转化 外源DNA 载体DNA 连接 重组分子 转化或转导 电穿孔或显微注射 原核细胞 受体细胞 真核细胞 扩增或表达 表达 基因工程的操作过程 切 接 转 增 检 目的基因的载体连接 --接，分子克隆的核心 第一个重组子的构建 1972年，美国斯坦福大学P. Berg等在PNAS上发表了 题为 ∶ “Biochemical method for inserting new genetic information into DNA of Simian Virus 40: circular SV40 DNA molecules containing lambda phage genes and the lactose operon of Escherichia coli. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 69:2904-2909, 1972” 标志着基因工程技术的诞生。 第一个基因重组子的构建 P.Berg S.N.Cohen 第 一 个 重 组 体 构 建 SV40 病毒是猿猴病毒，是一种 直径为450Å 的球形病毒，分子量为 6 28 ×10 道尔顿