环糊精葡萄糖基转移酶钙离子结合位点结构与功能分析.PDFVIP

生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biop hys ics 2013, 40(12): 1239~ 1246 糊精葡萄糖基转移酶钙离子 结合位点结构与功能分析* 1) 1) 1) 1, 2) 1, 2)** 班宵逢 李才明 鲍春辉 顾正彪 李兆丰 1) 2) ( 南大学食品学院，无锡2 14 122 ； 江南大学食品科学与技术国家重点实验室，无锡2 14122) 摘要 通过多重序列比对和晶体结构分析发现，钙离子结合位点Ca 和Ca 域普遍存在于环糊精葡萄糖基转移酶(CGT 酶) 中， 且两个位点处氨基酸残基具有较高的保守性，而钙离子结合位点Ca 芋仅存在于少数CGT 酶中 此外，研究发现，钙离子结 合位点可能与CGT 酶的环化活力、热稳定性和产物特异性密切相关 关键词 环糊精葡萄糖基转移酶，钙离子结合位点，结构，功能 学科分类号 Q814，Q71 DOI: 10.3724/SP.J.1206.2013.00031 作为 - 淀粉酶家族的成员，环糊精葡萄糖基 和功能进行分析，为进一步揭示钙离子结合位点在 琢 转移酶(CGT 酶，EC 9)不仅具有与 - 淀粉 CGT 酶中的生物学意义提供思路和方向 琢 酶相同的水解活性，还能催化三种不同的转糖基反 1 实验方法 应(歧化、偶合和环化)[1] 环化反应是CGT 酶的特 征反应，能将淀粉转化成由D- 吡喃型葡萄糖单元 1 1 序列来源 通过 - (1-4)- 糖苷键连接而成的环糊精，其中， 从美国国家生物技术信息中心(National Center 琢 -、 - 和 - 环糊精最为常见[2-3] 由于CGT 酶作 for Biotechnology Information，http ://www.ncbi.nlm. 琢 茁 酌 用淀粉所合成的产物为多种环糊精的混合物，因 /) 和 ExPASy 数据 库 (SIB Bioinformatics 此，根据生成环糊精的主要类型即产物特异性不 Resource Portal， http :///docs/swiss- 同，CGT 酶可主要分为 、 和 型 随着环糊精 prot_guideline.html) 获取来源不同、产物特异性不 琢 茁 酌 [4-5] 同的CGT 酶和具有代表性的 淀粉酶蛋白序列， 在食品、医药、化工等领 的应用越来越广 ， 琢 生产环糊精所必需的CGT 酶已成为当今研究的 见表 1 除非特定说明CGT 酶的来源，文中氨基 热点 酸序号一般以Bacillus c irc ulans 25 1 CGT 酶中氨基 钙离子结合位点广泛存在于 - 淀粉酶家族 酸残基顺序为基准 琢 中 目前，已有大量关于 - 淀粉酶钙离子结合位 琢 点的研究，发现钙离子结合位点处氨基酸残基与 - 淀粉酶的催化活力、热稳定性等密 相关[6-8] 琢 * 国家 自然科学基金， 苏省自然科学基金 对于CGT