高脂血症对大鼠阴茎勃起功能影响实验的研究.pdfVIP

钠和组胺的反应。结果显示，普通饮食组对药物的反应没有差别，而在高胆固醇 组，VEGF组平滑肌细胞最大松弛率明显高于生理盐水组。该实验提示VEGF能 减轻动脉粥样硬化对海绵体组织的损伤。上述作者131于2001年用改进的实验方法 进一步证明了上述观点。但该实验没有涉及NOS，而NOS又是海绵体平滑肌松 弛的关键因素，因此并没有触及疾病的本质。尽管如此，该文献还是为本课题研 究提供了比较良好的动物模型，且便于学习和引进:并且证明了VEGF的确在动 脉粥样硬化中起着重要的作用。 2002年3月LeeMC,El-SakkaA1141等人制作了创伤性动脉性ED的动物模型， 并在此模型基础上进行了VEGF干预的实验。通过结扎大鼠双侧骼内动脉制作成 动脉性ED模型，并给与VEGF海绵体注射，而对照组给予生理盐水注射。于术 后 1,2,6周分别从两组中抽出样本，给与海绵体神经电刺激观察勃起反应，记 录后处死取材，行组织化学以及电镜检查。结果显示结扎组老鼠在1.2周便恢复 了对电刺激产生勃起反应，而对照组最早是在6周才恢复对电刺激的反应。nNOS 染色显示VEGF组2周后逐步恢复，而对照组则没有。电镜显示，对照组阴茎背 神经的有髓神经以及无髓神经纤维萎缩，而VEGF组则部分恢复。同时，对照组 的海绵体平滑肌出现明显萎缩，而VEGF组则仅是偶尔可见。2002年6月，LinCS, HoHC1$1等人，通过手术结扎大鼠阴茎动脉形成动脉性ED的动物模型。实验组给 与VEGF海绵体注射，对照组给与生理盐水。通过反转录PCR技术以及免疫组化 技术比较两组海绵体组织中nNOSeNOS 以及iNOS的变化。结果显示，对照组 中三种NOS都显著降低，而实验组中三种NOS则明显高于对照组。同时，免疫 组化显示内皮细胞和平滑肌细胞都高表达 eNOS。值得一提的是该文献是第一个 报道海绵体注射VEGF后eNOS的变化。虽然这两个实验采用的均为急性缺血性 模型 (病理改变以萎缩及坏死为主)，与本课题涉及的动脉粥样硬化有着本质的 不同 (动脉粥样硬化以增生为主)，但该实验还是为本课题提供了一种良好的实 验方法，也暗示着在动脉粥样硬化中，VEGF也可能起着非常重要的作用。 大量研究证明，阴茎勃起的关键在于海绵体平滑肌的松弛，尽管影响海绵体 平滑肌松弛的因素很多，但目前研究表明NO/cGMP通路((NO/cGMPpathway)是勃 起过程的关键环节，NO对海绵体平滑肌的作用已被公认。而动脉粥样硬化作为 一种全身性、血管性疾病，可导致各个器官的损害，阴茎海绵体组织也不例外。 VEGF作为一种高效能的细胞因子，由于其强烈的促血管生长作用而日益受到人 们的重视。动脉粥样硬化是一种由内皮细胞、平滑肌细胞、单核一巨噬细胞、血小 板等多种细胞参与的增“生性”疾病，由这些细胞分泌的NO以及VEGF同样参与 动脉粥样硬化发生的病理生理过程。一方面，动脉粥样硬化影响NOS的表达和活 性。动脉粥样硬化能明显地使NO的产生减少。另一方面，NO和VEGF则可以 通过促进内皮细胞的再生、抑制血小板的栽附以及抑制平滑肌细胞的增殖来减轻 动脉粥样硬化的病理改变。正是这些矛盾之间的相互影响、相互作用决定了动脉 粥样硬化的发展趋势以及临床表现。由于动脉粥样硬化为缺血性疾病，既可以直 接导致海绵体内皮细胞的损害，也可以引起继发性的神经损害，何者为主要方面， 何者为次要方面，目前知之甚少，但这个问题的阐明对于动脉粥样硬化导致的ED 的发病机制以及治疗具有重要意义。因此，利用高胆固醇饮食建立动物模型，能 部分显示动脉粥样硬化的病理过程，从而能够利用这个 “平台“来研究动脉粥样硬 化时，阴茎海绵体组织究竟出现了何种变化。己有实验证明了VEGF可以减轻动 脉粥样硬化对海绵体平滑肌及内皮细胞的损伤。近来又有研究发现，在急性缺血 性动物模型中，海绵体组织神经纤维、内皮细胞、平滑肌细胞萎缩以及NOS活性 下降，而VEGF可以减轻这种变化，甚至可以逆转这种病理改变。而对于动脉粥 样硬化，目前这方面的研究还是一片空白。因此，本实验拟用高胆固醇饮食的方 法建立大鼠的动脉粥样模型，观察正常大鼠以及动脉粥样模型大鼠阴茎海绵体组 织中iNOS/eNOS活性的变化，随后给与阴茎海绵体内注射VEGF干预，观察注 射前后海绵体组织中iNOS/eNOS活性的变化。 本课题假说:动脉粥样硬化模型中，iNOS/eNOS活性均降低，但以eNOS的 降低更为显著。VEGF能够减轻这种损害。本课题目的:为进一步探讨动脉粥样 硬化性ED的发病机制以及治疗找到新的途径。