N离子注入选育色素产生菌Monascus的研究-化学反应工程与工艺.PDFVIP

第 19卷 第 4 期 Vol.19　No.4 2002 年12月 Journal of the Graduate School of the Chinese Academy of Sciences Dec.2002 简报 + ＊ N Monascus 1 1 ＊＊ 1 1 2 于　洋 　姚建铭 　虞　龙 　余增亮 　李　凯 (1 中国科学院离子束生物 程学重点实验室,等离子体物理研究所, 合肥　230031 ; 2 宁夏轻 业设计研究院瑞德天然色素公司, 银川　750001) (2002 年 1 月21 日收稿;2002 年4 月9 日收修改稿) + 　　应用10 keV 的N 离子注入, 对产红色素红曲菌进行了 变选育。在确定最佳注入剂 量后,经过两轮离子注入 变筛选,选育出1株高产突变株, 红色素色价提高38.1%,且色调适 宜。经传代培养, 其高产性状能稳定遗传。对该菌株的发酵特性也进行了研究。 　离子注入, Monascus, 红曲色素, 变,育种 　Q813 　　红曲色素是以大米为原料,经红曲霉(Monascus)发酵而制成的一种天然色素。红曲色素是多种成分 的混合物, 目前可以分离到20 余种组分, 已知结构的有6 种, 它们都是Arphilon 类有机化合物。近年来, 化学合成色素的安全性受到人们的怀疑,天然色素日益受到重视.另外红曲霉在产色素的过程中还产生 一些抗菌活性物质, 多种酶类, statin 类(如lovastantin)生理活性物质, 使之更为消费者所接受[1～4]。在色 素生产中,传统的固体发酵劳动强度大,效率低,容易染菌, 质量不易控制。随着 艺的改进, 液体深层发 酵法逐渐被广泛采用。它具有原料来源广, 业化生产容易,设备简单等优点。但是液体发酵的色价往往 低于固体发酵, 因此选育高产的适宜液体发酵的红曲色素产生菌就显得尤为重要。 　　在众多的诱变选育方法中,离子注入技术作为一种特殊的物理化学复合诱变方法已日趋成熟, 并成 功应用到多种 业微生物诱变选育中。离子注入质量、电荷、能量的参数可以按需要进行不同组合, 这种 联合作用不但使诱变具有较高的方向性和可控性,还可使产生的生物学效应比单一辐射更为丰富[5～7] 。 + 本实验应用10 keV 的N 离子注入,对红曲霉出发菌株63进行了诱变选育, 获得了较明显的效果。 1 　 1.1　 　　红曲霉63(Monacsus ruber ), 由宁夏轻 业设计研究院瑞德天然色素公司提供。 1.2　 　　分离培养基 :可溶性淀粉5%,麦芽糖4%,蛋白胨3%,琼脂1.8%. 　　种子培养基 :米粉3%, H PO 0.25%,NaNO 0.2%,MgSO ·7 H O　0.1%.用乳酸调pH 值至适 2 4 3 4 2 合。 　　发酵培养基 :米粉 8%,蛋白胨2.5%,NaNO 0.2%,MgSO ·7 H O 　0.1%.用乳酸调pH 值至适 3 4 2 合。 ＊国家九五攻关资助项目(96-538) 　于　洋, 男, 1976 年2 月生, 硕士生 ＊＊通讯作者:jmyao @mail.ipp.ac.cn 　4　　44 中国科学院研究生院学报 第19 卷 1.3 　 　　新鲜斜面用无菌水制成菌悬液, 接种于含50 mL 种子培养基的三角瓶(500 mL)中,250 rpm/min, 31℃培养24 h。取种液接种于含50 mL 发酵培养基的发酵瓶(500 mL)中, 250 rpm/min,3