高效液相色谱法原理.pdfVIP

液相色谱原理 ©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL 历史 色谱法原理 液相色谱系统 HPLC参数与术语 分离度公式 固定相与物理性质 了解范氏方程 色谱柱 ©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL 2 色谱法定义 是一种分离科学 在液相或气相中使化合物达到分子水平的分离 Chromato -- 颜色 Graphy -- 图像 首先在俄国科学家Tswett(茨维特)的试验中进行了描述. 样品－植物提取物 他将植物色素的石油醚提取液倒入装有碳酸钙的直立玻璃 管,再加入石油醚使其自由流下,结果色素中各组份互相分 离形成各种不同颜色的谱带,化合物得以分离 ©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL 3 色谱法简介 色谱法(Chromatography)溯源 —100多年前俄国植物学家Tswett(茨维特)分离植物色 素时采用的实验方法 —Tswett用希腊语chroma(色)和graphos(谱)描述 他的实验方法，即现在的Chromatography(色谱法) ©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL 4 Tswett 的色谱系统 ©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL 5 色谱发展史回顾 1903－1906 Tswett首次使用这套色谱系统 1930－1932 Karrer, Kuhn 和Strain用氧化钙、氧 化铝和氧化铁做吸附剂 1941 Martin 和Synge引入了柱分离色谱 1944 Gonsden,Gorrdon 和Mardin 介绍了纸分离 色谱 1951 Kirchner 引入了我们现在仍在使用的TLC 1952 James 和Martin 发展了气相色谱 1964 L.C.Moor发展了现在仍在使用的凝胶渗透色谱 （GPC） 1968 高效液相色谱出现了 ©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL 6 色谱法原理 色谱法的原理 —是利用混合物中各组份在不同的两相中溶解,分配,吸附 等化学作用性能的差异,当两相作相对运动时,使各组分 在两相中反复多次受到上述各作用力而达到相互分离。 —两相中有一相是固定的,叫作固定相(Stationary Phase),有一相是流动的,称为流动相(Mobile Phase),流动相又叫洗脱剂,溶剂。 相(Phase): —物理化学术语,特指在某一系统中,具有相同成分及相同 物理、化学性质的均匀物质部分。各相之间有明显可分 的界面。 ©2009 Waters Corporation | COMPANY CONFIDENTIAL 7 色谱法原理 分离是一个 物理过程。 固