碘缺乏对子代大鼠小脑组织形态损害与c-fos，c-jun与GAP-43表达影响地实验的研究.pdfVIP

，一～……一、 { 英文缩略语 { 、一一…～一．， ·5· 一 ～{～互 [；，；√ 一 碘缺乏对子代大鼠小脑组织形态损害及c—fos，c—jHB 和GAP一43表达影响的实验研究 刖 吾 hormones，TH)所必需的微量元素，人类 碘是合成甲状腺激素(thyroid 生存环境中缺碘可造成碘缺乏病(Iodinedeficiency 病广泛分布于世界各地，据报道川全球60多亿人群中受碘缺乏影响的人群 达15亿；中国是碘缺乏最严重国家之一，在我国有7亿多人口受碘缺乏的 影响。神经中枢的正常发育需要充足的碘及甲状腺激素，因此，在神经发育 的关键期缺碘将导致神经中枢的广泛损伤。小脑皮质分为颗粒层、蒲肯野 细胞层和分子层三层，由蒲肯野细胞、颗粒细胞、篮状细胞、星状细胞和高尔 基细胞构成。蒲肯野细胞是一个抑制性神经元，其轴突是小脑皮质的唯一 传出途径，其它四种神经元都是中间神经元，小脑的传人纤维和中间神经元 以蒲肯野细胞为中心构成了小脑皮质感觉运动整合功能的基本神经元环 路，小脑通过复杂的调节和反馈机制成为维持平衡和肌张力的协调中枢。 胚胎期，新生儿期碘缺乏与甲状腺机能减退将导致小脑形态发育受阻和功 能受损，严重的出现姿势及步态异常，肌张力改变，共济失调等旧)-。目前 碘缺乏损害小脑发育机制尚不完全清楚，故开展其相关机制研究具有重要 意义。 近年来，人们发现在碘缺乏与原癌基因表达及变异之间存在着一定关 系，碘缺乏既能使基因表达异常3Ln’‘n,使基因变异。在原癌基因家族中有一 类能被第二信使所诱导的原癌基因称为即刻早期基因(ImmediatelyEarly Genes，IEGs)。即刻早基因是指在受到外界刺激时对机体产生的神经递质、 激素、冲动传导等在短时问内即可表达的基因。c—los，C—jun基因是神经 细胞最常见的即刻早基因之一，参与细胞的多种生理过程M，，在脑损伤及 许多其他中枢神经病理情况下，c—los，c—jun基因表达和变化调控与神经 细胞病变的发生发展往往有密切关系H“o。 神经生长相关蛋白一43(Growth—associated ·6· 一种胞膜磷酸蛋白质，与神经元生长发育、突触形成及神经可塑性密切相 关H1，广泛分布于大脑、小脑、海马以及脊髓、背根神经节和自主神经系统。 它在轴突延长和突触形成整个时期表达都增加¨…，能调节神经元对轴突引 导信号的反应¨“，可促进神经元的生长、发育、神经再生及突触重建n2|。 碘缺乏导致小脑功能异常，可能是碘缺乏对小脑组织神经元，突触发育产生 影响，因而研究碘缺乏对GAP一43的影响，可从突触及信号传导和蛋白分 子水平阐明缺碘性脑损害的机制。 本研究通过喂食低碘饲料建立碘缺乏大鼠模型，观察碘缺乏大鼠小脑 组织形态的改变，同时观察碘缺乏大鼠子代大鼠小脑C—fos，C—itin和GAP 响，为探明碘缺乏导致小脑形态改变及影响小脑发育的机理提供实验依据， 且可为碘缺乏导致的小脑功能性疾病的预防、早期诊断、病情控制提供理论 依据与基础资料。 材料与方法 1．主要试剂 FT。兀j免疫放射试剂盒(天津德普生物技术和医学产品有限公司) c—fos，C-jun兔抗大鼠I抗(美国SantaCruz公司) GAP一43兔抗大鼠I抗(美国SantaCruz公司) 羊抗兔Ⅱ抗(福州迈新生物技术开发有限公司) DAB显色剂(福州迈新生物技术开发有限公司) 2．主要仪器 JP) 1一放射免疫计数器(西安核仪器厂：FJ一2008PS) 超薄切片机(奥地利Ultracut—E，Rechert—Jung，) 显微镜(日本OLYMPUS) 3．实验动物及分组 提供)，其中雌性30只，雄性15只。适应性喂养一周后，按体重将雌鼠随机 deficient 分成对照