天然磷脂的色谱法分离纯化研究进展.PDFVIP

第 20 卷第 1 期 　　　　　　　　　　　　　　　分 析 科 学 学 报 2004 年 2 月 Vol. 20 　No. 1 　　　　　　　　　　JOURNAL OF ANAL YTICAL SCIENCE Feb. 2004 文章编号 (2004) 天然磷脂的色谱法分离 、纯化研究进展 何海波 ,张维农 ,达世禄 ,冯钰　 (武汉大学化学与分子科学学院 ,武汉 430072) 摘 　要 :天然磷脂是一类含磷酸根的类脂化合物的总称 ,在医药学 、营养学 、化妆品和生 命科学领域等有重要的应用价值 。本文综述了不同原料样品中磷脂种类和其各分子的 色谱法分离 、纯化 。着重讨论高效液相色谱法分离技术及其影响因素 。最后概述了有 助于提高分离选择性 、检测灵敏度的化学衍生化方法 。 关键词 :天然磷脂 ;色谱法 ;分离 ;纯化 中图分类号 :O658 　　　文献标识码 :A 1 　引　言 磷脂( Phospholipid) 和蛋白质是组成细胞膜最主要成分 ,细胞膜的磷脂双层结构是研究生物膜结构和 功能的基础 。70 年代以来 ,随着分子生物学发展 ,逐步发现磷脂是众多信息分子前体的贮备形式 ,是神经 细胞传递信息、合成脂蛋白代谢脂肪的生物活性物质 ;亦是心、脑 、循环 、呼吸、生殖等许多疾病形成的化学 介质 。磷脂代谢与化学信息分子成为当今分子生物学 、生物医学活跃的前沿研究领域[1 ] 。天然磷脂是一 ( 类含磷酸根的类脂化合物的总称 。按其分子结构组成可分为甘油醇磷脂和神经醇磷脂 典型代表为神经 ) 鞘磷脂 两大类 ,其结构特征是 :分别以甘油醇和神经氨醇为主 。大多数磷脂是含磷酸根和含氮有机碱基 ( ) ( ) ( ) 的脂肪酸甘油脂衍生物 ,如卵磷脂 PC 、脑磷脂 PE 和丝氨酸磷脂 PS 等 。这些磷脂中 ,其中以卵磷脂 的生物活性及药物治疗作用的研究最引人注 目。磷脂分子既含有疏水性的脂肪酸基 ,又含有亲水性的磷 酸脂基 ,因此 ,它可用作乳化剂 、稳定剂和湿润剂 ,是一种两性的表面活性剂 。由于磷脂在生命科学的重要 性被揭示 ,在分子水平上研究 ,引发天然磷脂作为药物 、功能食品等开发研究热潮 。近 20 年来生物医学研 究表明 ,磷脂具有调节生理机能、增强免疫力 、防治心、脑 、血管等疾病的作用 ,亦可作为药物载体提高药物 治疗指数 。各种纯度天然磷脂正在医药 、保健品、化妆品等领域推广应用[2 ] 。分离和纯化逐渐成为影响 [3 ] ( ) [4 ] 磷脂研究的关键因素 。国内有关磷脂生理活性 、研究进展已有综述 。近年来使用薄层色谱法 TLC 、 柱色谱法[5 ]和正相 HPLC[6 ,7 ]可将经溶剂提取后的磷脂进一步分离 、纯化 ,实现了各类不同的磷脂组分的 分离 。而国外对磷脂的研究已达到分子分离分析水平 ,使用一系列分离技术 ,如固液吸附色谱法 、薄层色 谱法和正相高效液相色谱法将各类不同磷脂组分分离 , 随后用液相色谱质谱 、反相高效液相色谱或用磷 脂酶 C 将磷脂转化成甘油二酰的衍生物可实现磷脂分子种类的分离[8 ] 。随着现代分离技术的发展 ,可同 时分离和定量测定磷脂各类分子的亚组分 。 ( ) 大量文献表明 , 目前色谱法分离磷脂主要是研究动植物组织中的甘油醇磷脂 GPL 。磷脂分离分析 ( )