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2 脂质及薄层层析
实验二 脂 质 的 薄 层 层 析 ;【实验目的】 ;【实验原理】; 各种脂质在硅胶薄层上的移动速率用Rf(Rate flow)值表示:
;【实验器材与试剂】;【实验步骤】;晃动玻璃板,使胶均匀分布(动作要利索);2、配展开剂:50ml 石油醚-丁酮-乙酸(体积之比为95:4:1)。将配好的展开剂放入层析缸中,盖好。(液面不高于点样处);3、点样:不要画线,用毛细玻璃管分别吸取各种脂质的标准液及试样液各少许(细管口不带液滴),在距层析薄板一端 2 cm 处点样,间距1~2cm 分别点样 1 滴。
点样圈的直径应小于3mm,
记录各样品的排列位置,
待样品的溶剂蒸发干后再
放入展层缸中。 ;4、展开:把已点好样品的薄板30°倾斜于层析缸中,展开剂的高度必须在薄板点样的起点线以下。密闭层析缸,让其展开。;;5、烘干:待展开剂的前沿上升到距薄板顶端2cm处,取出薄板,并于展开???到达处用虚点作记号,将薄板于
室温干燥5min后,置80℃
烘箱中烘干约20min。;;7. 测量、计算: 分别测量X、Y值,计算各试剂的Rf值。;注意事项;;【结果分析与讨论】 【思考题】;下周实验:总氮量的测定----凯氏定氮法
(403实验室)
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