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第1章 蛋白质及结构与功能
遵义医药高等专科学校 遵义医药高等专科学校 生 物 化 学 主讲:杨正久 遵义医药高等专科学校 蛋白质的生理功能: 蛋白质是人体的基本成分,几乎所有的组织都含有蛋白质,是生命活动的物质基础,具有:物质运输、物质代谢的催化与调节、肌肉收缩、血液凝固、机体防御及信号转导等生理功能。 第一节 蛋白质的分子组成 组成蛋白质分子的主要化学元素包括:C、H、O、N、S、P、Fe、I、Zn、Cu、Mo等。 其中,在不同蛋白质样品中,N元素的含量相对稳定,约为16%,故每克氮相当于6.25(100/16)克蛋白质。 定氮法:样品中含蛋白质克数=样品的含氮克数×6.25 练习: 测得10g蛋白质样品中含氮量为0.08g,该蛋白质样品的蛋白质含量是多少? 组成蛋白质的基本单位是氨基酸(amino acid)。自然界存在300多种氨基酸,但是基因编码的氨基酸只有20种。这些氨基酸属于L-?-氨基酸。 氨基酸的解离 根据R侧链基团解离性质的不同,可将氨基酸分为两大类: 1.非极性氨基酸: 侧链主要为脂肪族疏水基团。 2. 极性氨基酸 极性中性氨基酸:侧链含有(—OH)或(—SH)等亲水基团。 酸性氨基酸——Glu,Asp;侧链基团在中性溶液中解离后带负电荷。 碱性氨基酸——His,Arg,Lys;侧链基团在中性溶液中解离后带正电荷。 第二节 蛋白质的分子结构 (一)肽键与肽链: 肽:氨基酸通过肽键连接起来形成 的线性聚合 物。 肽键:一个氨基酸分子的?-羧基与另一个氨基酸 分子的?-氨基脱水缩合形成的共价键。 氨基酸残基:肽中的氨基酸称为氨基酸残基。 多肽链具有方向性,头端为氨基端(N端),尾端为羧基端(C端)。 生物体内具有一定生物学活性的肽类物质称生物活性肽。 重要的生物活性肽有谷胱甘肽(GSH)、神经肽、肽类激素等。 牛胰岛素的一级结构 三、蛋白质的空间结构 蛋白质的二级结构(secondary structure)是指蛋白质多肽链主链盘曲、折叠所形成的空间结构。 二级结构的主要形式有α-螺旋、β-折叠、 β-转角与无规卷曲。 维系蛋白质二级结构的主要化学键是氢键。 (二)蛋白质的三级与四级结构 维系蛋白质三级、四级结构的化学键是氢键、离子键、范氏引力、疏水键等非共价键。 亚基(subunit)就是指参与构成蛋白质四级结构的、每条具有三级结构的多肽链。 血红蛋白(hemoglobin)的四级结构 蛋白质分子的结构层次 第三节 蛋白质结构与功能的关系 镰刀状红细胞贫血Hb ?-链一级结构的改变 在镰刀状红细胞贫血患者中,由于基因突变导致血红蛋白?-链第六位氨基酸残基由谷氨酸改变为缬氨酸,血红蛋白的亲水性明显下降,从而发生聚集,使红细胞变为镰刀状。 二、蛋白质分子构象与功能的关系 蛋白质的空间构象与其功能有密切关系,蛋白质构象改变,生物学功能也随之改变。 变构效应:生物体内某些小分子物质与蛋白质作用,使其构象改变而生物学功能也随之改变,这种作用称为变构效应。 第四节 蛋白质的理化性质 蛋白质分子普遍含有酪氨酸残基和色氨酸残基(分子结构中含有共轭双键),在紫外光280nm处有特征吸收峰,其吸收值与浓度成正比。 二、蛋白质的等电点与电泳 由于蛋白质分子中氨基酸残基的侧链上存在游离的氨基和游离的羧基,另外,多肽链的N端和C端分别有游离的α-氨基和α-羧基,因此蛋白质具有两性解离的性质。 等电点(pI):当蛋白质溶液处于某一pH值时,蛋白质解离成阴、阳离子的趋势相等,蛋白质为兼性离子,净电荷为零,此时溶液的pH称为该蛋白质的等电点( pI)。 蛋白质的两性解离与等电点 (二)电泳 带电颗粒在电场中向电性相反的电极移动的现象称 为电泳(electrophoresis)。 不同蛋白质分子所带电荷量不同,且分子大小及形状也不同,故在电场中的移动速度也不同,据此可对蛋白质进行分离和鉴定。 血浆蛋白质pI在pH5.0左右,正常血浆pH为7.4,血浆蛋白以阴离子存在带负电,故可在电场中向阳极移动。 三、蛋白质的胶体性质 蛋白质分子的颗粒直径已达1~100nm,处于胶体颗粒的范围。因此,蛋白质溶液属于胶体溶液。 稳定蛋白质亲水溶胶的两个重要因素是蛋白质分子表面的水化膜和同种电荷。 蛋白质颗粒的表面电荷和水化膜 三、蛋白质的变性、沉淀和凝固: 在某些物理或化学因素的作用下,蛋白质严格的空间结构被破坏(不包括肽键的断裂),从而引起蛋白质的理化性质改变和生物
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