纸色谱和氨基酸及纸上电泳.pptVIP

* * 实验十九、纸色谱 实验二十、氨基酸的纸 上电泳 一、目的与要求： 1、了解纸色谱的基本原理。 2、学习用纸色谱法分离氨基酸的一般操作。 3、了解电泳的基本原理，学会纸上电泳的操作方法。 4、初步掌握用纸上电泳法分离鉴定氨基酸。 二、基本原理 （一）纸色谱是一种分配色谱。滤纸作为载体，纸纤维上吸附的水为固定相，与水不相混溶的有机溶剂作为流动相。 当样品点在滤纸的一端，使流动相从有样品的一端上行，通过毛细管作用，流向另一端时，依靠溶质在两相间的分配系数不同而达到分离。极性大的组分在固定相中分配得多，随流动相移动速度慢，极性小的在流动相中分配得多，随流动相移动速度快一些。 三、纸色谱实验步骤（观看录像） 1、点样； 2、展开； 3、显色与结果处理——计算出两个物质的Rf值。 纸色谱图 （二）在一定的条件下，带电的质点在电场作用下，向着与其所带电荷相反的电极移动，这种现象称为电泳。 不同氨基酸在同一pH值的溶液中，所带的电荷不同。在同一电场中，带不同电荷的各个氨基酸泳动的方向和速度不相同，因此将不同的氨基酸在同溶液中进行电泳时，由于各个氨基酸移动的方向和距离都不相同，从而达到分离鉴定的目的。 四、纸上电泳实验步骤（观看录像） 1、点样与润湿； 2、电泳； 3、显色； 4、结果处理——标明正、负极和氨基 酸。