细菌耐药表型及检测方法.ppt

细菌耐药表型的检测方法 细菌耐药表型的检测 一、β-内酰胺酶的检测 （1）头孢硝基噻吩显色法（Nitrocefin）：制配纸片→灭菌水湿润→涂测试菌于纸片上，10min观察纸片颜色，显红色为阳性（葡萄球菌应放置1h内观察）。 （2）酸度法：青霉素→β-内酰胺酶水解→青霉酸、pH6.8以下→酚红指示剂由红色（构橼酸钠缓冲液pH8.5）变为黄色。 （3）碘测定法：β-内酰胺酶破坏β-内酰胺环，碘与破坏后的β-内酰胺结合，使兰色的淀粉—碘复合物转变成无色。 （4）仪器测定法：Vitek、Microscan的药物测试卡中均带有检酶功能。 二、ESBLS检测 （1）纸片扩散初筛：头孢他啶（30μg/片）抑菌圈≤22mm 头孢噻肟（30μg/片）抑菌圈≤27mm 头孢曲松（30μg/片）抑菌圈≤25mm 氨曲南（30μg/片）抑菌圈≤27mm （2）肉汤稀释法：上述药物MIC≥2μg/ml可疑为ESBLS。（表型确证试验：对2个任何一个药物MIC，在加克位维酸比不加克拉维酸的MIC值降低3个以上对倍稀释度判为ESBLS）。 （3）双纸片协同确认试验： 头孢他啶（30μg/片）与头孢他啶（30μg）/克位维酸（10μg） 头孢噻肟（30μg/片）与头孢噻肟（30μg）/克拉