重组AiiA蛋白可溶性表达及发酵条件优化.PDFVIP

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2017-10-03 发布于江苏
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重组AiiA蛋白可溶性表达及发酵条件优化.PDF

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江西农业大学学报 20 11，33 (6):1219 － 1227 http :/ / xuebao． jxau． edu． cn Acta Agriculturae Universitatis Jiangxiensis E － mail :ndxb7775@ sina． com 重组AiiA 蛋白可溶性表达及发酵条件优化 1 1 2 1 1 1* ，，，，，杨彩云杜慈黄平温真毛惠民杨梅 (1．， 350108 ;2 ．，福建师范大学生命科学学院福建福州福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心福建福州 350108) : E． coli BL21 (DE3)-pET29a-aiiA AiiA ，摘要通过摇瓶培养确定重组工程菌表达蛋白可溶性表达的最优化条件、 (pH7 ． 0 )、、考察以牛肉膏蛋白胨为基础培养基添加不同种类的碳源不同浓度的磷酸钾缓冲液微量元素乙酸 AiiA ， 15 L ，以及调整牛肉膏蛋白胨的比值对蛋白可溶性表达的影响并用发酵罐进行补料分批发酵确定高密。 : 10 g / L ， 7 ． 8 g / L ， 31． 2 g / L ，NaCl 5 g / L ，度发酵工艺条件结果表明优化发酵培养基为蔗糖牛肉膏蛋白胨 K HPO ·3H O 14 g / L ，KH PO 5 ． 3 g / L ，4 mL / L 。 AiiA 4 ． 31 mg / mL 。 2 4 2 2 4 微量元素优化后蛋白可溶性达在 15 L ， 24 h ， OD 18． 5 ， 5 ． 9 mg / mL ， AiiA 发酵罐补料分批发酵培养中诱导时发酵菌 600 达到可溶性蛋白表达量占 50 ． 7% ，。总蛋白实现了扩大培养 :AiiA ; ; 关键词蛋白补料分批发酵条件优化