改善苯丙氨酸解氨酶重组大肠杆菌细胞通透性提高反式肉桂酸转化率.PDFVIP

第 22卷第 6期 高 校 化 学 工 程 学 报 No6 、，o122 2008 年 12月 JournalofChemicalEngineeringofChineseUniversities Dec． 2008 文章编号：1003—9015(2008)06—1015-05 改善苯丙氨酸解氨酶重组大肠杆菌细胞通透性提高反式肉桂酸转化率 崔建东1．2，贾士儒 17谭之磊 (1．天津科技大学 天津市工业微生物重点实验室，天津 300457； 2．河北科技大学 生物科学与工程学院，河北 石家庄 050018) 摘 要：研究了不同表面活性剂(曲通．X．100、Tween．80、十六烷基三 甲基溴化胺(CTAB)、十二烷基硫酸钠(SDs))和有 机试剂(丙酮、异丙醇、乙醇)对苯丙氨酸解氨酶重组大肠杆菌细胞通透性的影响。结果表明曲通-X-100、Tween一80、 SDS、异丙醇和乙醇对提高细胞的通透性没有显著影响，但 CTAB和丙酮可以显著的改善细胞通透性，提高反式肉桂 酸转化率。原予力显微镜检测结果表明，用 0．15g．LCTAB和 60％丙酮处理细胞后可以明显的改变细胞形态，与对照 (未处理细胞)相比，处理后的细胞表面粗糙，多皱折，表明细胞膜的通透性得到提高。流式细胞仪检测表明，0l5g．L CTAB处理细胞后，平均荧光道数(MnX)是对照(未处理细胞)的23倍，细胞通透性得到显著提高，反式肉桂酸转化率 是对照的 183倍，达到82％。60％丙酮处理细胞，MnX是对照的28倍，反式肉桂酸转化率是对照的 1．90倍，达到84．9％。 关键词：苯丙氨酸解氨酶；重组大肠杆菌；表面活性剂：细胞通透性；反式肉桂酸转化率 中圈分类号：Q813l1 文献标识码 ：A EnhancingConversion RatioofTrans—CinnamicAcidsbyImprovingthePermeability ofRecombinantEscherichiacon CUIJian．dong ， JIAShi。ru ， TAN Zhi．1ei (1．TianjinKeyLaboratoryofIndustryMicrobiology,TianjniUniversityofScienceandTechnoloyg,Tianjin300457， Chnia；2．CollegeofBioengineering，HebeiUniversiytofSciencenadTechnology，Shijiazhunag050018，China) Abstract： Theeffectsofvariousorganicsolvents(acetone，isopropyl，alcoholandethnao1)nadsurfactants (triton—X-100，tween8O，sodiumdodecylsulfate(SDS)nadcetyltrimethylammoniumbromide(CTAB))onthe permeability ofrecombinantEscherichiacolicells．which isimportantfortheproductionofphenylalanine ammonialyase(PAL)andtheconversionoftrans-cinnamicacid，werestudied．Theresultsshowthatthe isopropylalcohol，ethanol，triton·X—l00，SDSna dtween80failtoenhna ceremrakablythepermeabilityofthe recombinantE．colicells．HowevertreatingtheE．colicellswithacetoneorC AB samoreeffectivestrategy t