恒河猴大脑皮质星形胶质细胞的原代培养及鉴定-中国细胞生物学学报.PDF

– DOI: 10.11844/cj cb.2017.01.0206 中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2017, 39(1): 58 64 技术与方法 恒河猴大脑皮质星形胶质细胞的原代培养及鉴定 1,2 1 1 1 1 1 1* 王建斌 冯 敏 廖 芸 王丽春 张 莹 范胜涛 李琦涵 1 ( 中国医学科学院医学生物学研究所北京协和医学院, 云南省重大传染病疫苗研发重点实验室, 昆明650118; 2 中国医学科学院病原生物学研究所北京协和医学院, 北京100730) 摘要 为建立有效纯度高的恒河猴星形胶质细胞体外培养体系, 无菌条件下取6月龄恒河猴 婴猴的大脑皮质, 除去白质, 充分剪碎后机械吹打制成细胞悬液接种培养, 待原代培养的细胞长满 培养皿后, 通过恒温摇床振荡和传代差速贴壁除去寡突胶质细胞、成纤维细胞等, 得到纯化后的星 形胶质细胞, 并用GFAP-FITC(glial fibrillary acidic protein-fluorescein isothiocyanate)免疫荧光法对所 获细胞进行鉴定。分离培养的细胞具备典型的星形胶质细胞形态, 并表达星形胶质细胞特异性抗 原GFAP(glial fibrillary acidic protein), 纯化后获得了高纯度的恒河猴星形胶质细胞。采用该培养方 法成功建立原代恒河猴星形胶质细胞培养体系, 为体外研究嗜神经性病毒、神经系统疾病及其相 关中枢神经病理机制等提供了可靠的细胞模型。 关键词 星形胶质细胞; 恒河猴; 原代培养; GFAP Primary Culture and Identification of Astrocytes from Cereral Cortex of Rhesus Macaque 1,2 1 1 1 1 1 1* Wang Jianbin , Feng Min , Liao Yun , Wang Lichun , Zhang Ying , Fan Shengtao , Li Qihan 1 ( Institute of Medical Biology, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Yunnan Key Laboratory of Vaccine Research and Development on Severe Infectious Diseases, Kunming, 650118, China; 2 Institute of Pathogen Biology Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing, 100730, China) Abstract The aim of this study is to establish an effective method to culture and identify the astrocytes from cerebral cortex of rhesus macaque. A male 6-month-old neonatal rhesus macaque was used, and