氮源对干酪乳杆菌屎肠球菌.PPT

氮源对乳酸菌发酵生物量 及耐干燥能力的影响 陈振民 华中农业大学 Email: zmchen@ Tel简介 ?氮源作为构成生物体的蛋白质、核酸及其他氮素化合物的原料，是微生物生长的营养因子。 有机氮源：蛋白胨，酵母提取物，牛肉膏，豆粕，麸皮，脱脂乳，玉米粉等 无机氮源：各种铵盐、硝酸盐和氨水等 氮源对乳酸菌生物发酵量的影响 ?氮源对pH的下降有缓冲作用 氮源对乳酸菌的生物量，产酸能力，代谢能力都有影响。 S.Lwright的研究确定了以乳清和脱脂乳为基质的pH控制型生长发酵剂培养基的最佳配方(S.L.wright,1992) 寻找合适的氮源能提高乳酸菌的生物发酵量 乳酸菌生长到一定阶段产生大量乳酸和其盐类物质而产生抑制作用。 氮源对嗜酸乳杆菌L621发酵生物量的影响 基础培养基的氮源筛选 蛋白胨作为氮源培养L621效果最好。 以1%葡萄糖为固定碳源，以1%不同蛋白胨配制成不同的碳氮培养基 氮源对嗜酸乳杆菌L621发酵生物量的影响 増菌培养基氮源优化 以基础培养基为对照，添加不同的氮源物质对嗜酸乳杆菌L621的影响。 表 不同氮源对嗜酸乳杆菌L621菌数的影响 因素 菌数/×107 因素 菌数 /×107 CK CK+牛肉膏1% CK+酵母粉1% 34.3 54.5 72 CK+柠檬酸二胺0.3% CK+柠檬酸二胺0.3% 50 35 酵母粉作为微生物生长培养基的经典成分，富含丰富的氨基氮、有机酸类、矿物质类及维生素类等水溶性物质，对比无机氮源，对嗜酸乳杆菌L621的生长有较明显的促进作用。 恒定pH发酵解除了乳酸的积累抑制作用，乳酸菌大量生长，这时培养液中碳氮源的不足就成了抑制菌体生长的主要因素了。 培养9h后，补料（10%乳糖+20%酵母膏） 氮源对嗜酸乳杆菌L621发酵生物量的影响 碳氮源补料发酵 培养9h以后菌数逐渐高于不加补料的菌数，充分说明培养液中乳糖和蛋白的不足限制了嗜酸乳杆菌L621的进一步生长。 添加补料延长了嗜酸乳杆菌L621的快速生长期，增加了单位体积的菌数，在15h 菌数达到 8.82×109 cfu/mL。 氮源对干酪乳杆菌、屎肠球菌、粪链球菌发酵生物量的影响 以2.5%的蛋白胨、酵母提取物、牛肉膏、蛋白胨+酵母提取物(1:l)、蛋白胨+牛肉膏(1：l)替代MRS培养基中氮源。 3株乳酸菌最佳利用氮源均为酵母提取物。 氮源对植物乳杆菌和干酪乳杆菌生物量的影响 三株植物乳杆菌（11118，10171，11095），两株干酪乳杆菌（11050，11052），研究有机氮源及无机氮源对其生物量的影响。 11118,11050和10171的最适氮源是大豆蛋白胨，11095的最适氮源是胰蛋白胨，而11052的最适氮源是酵母膏(0.5%)和蛋白胨(1%)的混合物。 说明有机氮源能提高乳酸菌的生物量，无机氮源则无法满足这五株乳酸菌的生长需求。 氮源对乳酸菌产细菌素的影响 乳酸菌素的产生通常与细胞生长量成正比，培养基只有满足细菌生长的前提下，才能保证乳酸菌素的大量产生和分泌，因此研究氮源对产乳酸菌素的影响也非常必要。 植物乳杆菌L6在提供无机氮源下无法满足细菌的生长，而不同的有机氮源对细菌素的产生存在影响，其中利用大豆蛋白陈和酵母膏作为氮源的抑菌直径较大。 有机氮源可满足细菌生长需要以及中和代谢抑制物乳酸。 氮源对乳酸菌耐干燥的影响 ?某些氮源能防止微生物细胞等生物活性物质由外向内渗透溶质 可保护其在速冻和溶解时产生的损害，有作为干燥保护剂的潜能。 干燥会对乳酸菌细胞形成一定的危害，如细胞膜成分的丧失及膜的渗漏和穿孔。 保护剂可以改变生物样品冷冻干燥时的物理、化学环境，减轻或防止冷冻干燥或复水对细胞的损害，尽可能保持原有的各种生理生化特征和生物活性。 氮源对乳酸菌耐干燥的影响 脱脂乳基础保护剂 选择脱脂乳作为基础保护剂，以0.5cm为冻干厚度，配制8%，10%，12%，14%的不同浓度脱脂乳，等量无菌水对照。 脱脂乳浓度/% 冻干前菌数 / cfu/mL 冻干后活菌数 / cfu/mL 冻干存活率 /% 0 8 10 12 14 5.96×109 5.96×109 5.96×109 5.96×109 5.96×109 6.68×108 2.51×109 2.89×109 2.66×109 1.36×109 1.12 42.1 48.5 44.6 22.8 不加脱脂乳的对照组冻干存活率仅1%左右，绝大多数菌体在冻干过程中死亡，浓度为10%的脱脂乳对乳酸菌冻干存活率可达48