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蛋白质及透析
实验11 蛋白质的透析 一、实验目的 学习透析的基本原理和操作 二、实验原理 蛋白质是大分子物质,它不能透过透析膜而小分子物质可以自由透过。在分离提纯蛋白质的过程中,常利用透析的方法使蛋白质与其中夹杂的小分子物质分开。 三、器材 1、透析管或玻璃纸 2、烧杯 3、玻璃棒 4、电磁搅拌器 5、试管及试管架 四、试剂 1、蛋白质的氯化钠溶液 3个除去卵黄的鸡卵蛋清与700mL水及300mL饱和氯化钠溶液混合后,用数层干纱布过滤。 2、10%硝酸溶液 3、1%硝酸银溶液 4、10%氢氧化钠溶液 5、1%硫酸铜溶液 五、实验操作 1、用蛋白质溶液作双缩脲反应。 2、向火棉胶制成的透析管中装人10~15mL蛋白质溶液并放在盛有蒸馏水的烧杯中(作法见第二章,或用玻璃纸装入蛋白质溶液后扎成袋形,系于一横放在烧杯的玻璃棒上)。 五、实验操作 3、约1小时后,自烧杯中取水1~2mL,加10%硝酸溶液数滴使成酸性,再加入1%硝酸银溶液1~2滴,检查氯离子的存在。 4、从烧杯中另取1~2mL水,做双缩脲反应,检查是否有蛋白质存在 五、实验操作 5、不断更换烧杯中的蒸馏水(并用电磁搅拌器不断搅动蒸馏水)以加速透析过程。数小时后从烧杯中的水中不能再检出氯离子。此时停止透析并检查透析袋内容物是否有蛋白质或氯离子存在(此时应观察到透析袋中球蛋白沉淀的出现,这是因为球蛋白不溶于纯水的缘故)。 六、思考题 蛋白质透析的操作要点及主要事项 * *
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