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血清白蛋白测定及紫外分光光度计及使用
血清白蛋白（ALB）的测定 (Assays for Serum Albumin) （溴甲酚绿染色法） 一、原理 二、测定方法 三、参考值 四、临床意义 五、方法学评价 六、注意事项 一、原理 在pH4.2缓冲液中，溴甲酚绿（BCG）与白蛋白结合形成蓝色复合物（血清白蛋白在pH4.2的缓冲液中带正电荷，在非离子型表面活性剂存在时，可与带负电荷的染料溴甲酚绿结合形成蓝绿色复合物），在波长620nm处有最大吸收峰，其颜色深浅与白蛋白浓度成正比。与经过同样处理的白蛋白校准液进行比较，即可计算出样品中白蛋白含量。 溴甲酚绿（BCG）与血清蛋白呈非特异性反应，但是在反应的30秒钟内溴甲酚绿（BCG）与白蛋白结合形成蓝色复合物呈特异性反应。因此反应结束后应立刻比色测取吸光度。 二、测定方法 1、加样： 试管三只 于空白管中加入蒸馏水10 μl，各管充分混匀。 2、分光光度计测定方法：波长620nm，空白管调零，测定标准管和测定管吸光度值，按公式计算测定结果。 计算公式： （40g/L） 三、参考值： 总蛋白：62~82 g/L 白蛋白：35~55g/L 球蛋白：20~30 g/L 白蛋白/球蛋白=1.5~2.5/1 四、临床意义： 1、白蛋白/球蛋白=1.5~2.5/1，通过计算其比值可以判定肝脏的功能情况； 2、白蛋白降低，其比值降低或倒置：慢性肝炎（肝细胞功能降低）、肝硬化（肝细胞坏死、肝腹水）； 3、球蛋白大量降低：机体免疫功能降低。 五、方法学评价 1、操作简单、快速，受干扰因素小 2、线性范围：10～60g/L, 3、RCV＜4%（批内重复测定变异系数） 4、白蛋白的测定方法：有色氨酸含量法、燃料结合法、电泳法、免疫化学法和电化学测定法。 六、注意事项 1、应保持PH为3.8 2、BCG与多种蛋白呈颜色反应，及与a-球蛋白、运铁蛋白、结合珠蛋白结合显色，但血清中BCG在30秒内与白蛋白的反应最快，且呈主导地位 3、实验小组分批间隔保温。 * * 10 样 品（μl） 10 标 准 液（μl） 2 2 2 工作试剂（ml） 测定管（U） 标准管（C） 空白管（B） 试剂
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