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2017-10-09 发布于北京
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构建抑制NF-кB信号通路的药物筛选模型.pdf

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构建抑制NF-кB信号通路的药物筛选模型.pdf

第19卷第5期激光生物学报 VoI．19No．5 20lO年10月 ACTALASERBIOLOGYSINICA Oct．20lO doi：10．3969／j．issn．1007-7146．20lO．05．003 构建抑制NF—KB信号通路的药物筛选模型张立鹏，李成海，刘明耀，罗剑+ (华东师范大学生命科学学院生命医学研究所，上海200241) 摘要：NF．KB已被证明在肿瘤和炎症过程中起到至关重要的作用。因此，建立抑制NF．KB信号通路的药物筛选模型至关重要。利用荧光素酶报告基因技术与蛋白印迹技术分别探索TN№处理浓度及时间对NF-KB报告基因表达和NF．KB抑制亚单位IKBa降解的影响，进而构建NF．KB信号通路抑制剂药物筛选模型。实验结果 nmoL／L 表明，0．Ol TNFa作用24h即能刺激HE比93T细胞中NF．KB报告基因较高水平的表达，且其表达量与 nmoL／L TNFn的剂量和处理时间呈正相关性；0．01 TNF仪作用5 min一30 告基因检测筛选体系和NF—KB抑制亚单位降解筛选体系两种体系稳定可行。结果证明，两种模型可以用于NF- KB信号通路抑制剂药物的筛选。关键词：NF．KB；药物筛选模型；TNFa；lKBa；藤磺酸· 中图分类号：Q29t；R915 文献标识码：A 文章编号：l007．7146(20lo)05∞580旬7 ModelConstructionBasedon Screening Inhibiting Drug NF-KB SignalingPathway zHANG J泌n‘ Ck玮g—k矗。UUM讧培一y∞。LUo h·peng，u sch∞lof【jfe chinaNo硼al science8锄d scie肿e8，E鲫t (InstitIIte“Biomedical mle i8kndwn鼬a ane鹪emialintIIe Abstract：NF—KB maj甜缸an8cTipti蚰f∽torm砒phy8 tionand a t0鸵t 8 model NF—KB c锄cer．Themf确，“’spmmising8臼砒egy up dnlg∞陀eningbyinhibitingsi伊laling e船c协oftlleco北entratio鹏蚰dtimeofTNFa we地麟plored∞tlIe patllway．ne pmc∞sing NF-KB．1uc弛po咖rge舱 the ofIKBa、riatlle westem luc滟r∞e∞say粕dblot硒8ay．The肥sult8 exp他ssion锄ddegradation showed，tlle麟pres-