水牛体外生产胚胎发育能力的研究.pdfVIP

畜牧与兽医2013年第45卷第5期 水牛体外生产胚胎发育能力的研究 杨春艳，庞春英，郑海英，黄芬香， 尚江华，王建，杨炳壮，梁贤威+ (中国农业科学院广西水牛研究所／农业部(广西)水牛遗传繁育重点实验室，广西南宁530001) 摘要：为了探讨屠宰场卵巢体外生产胚胎(IVF)、OPU(ovum d 囊胚的比率(46．8％)高于6d、8d和9d的囊胚比率(17．7％、23．0％、12．5％，P0．01)；OPU—IVF7d囊胚的比率(44．5％)高于6d、8d 6 和9d的囊胚比率(17．6％、27．8％、9．7％，P0．叭)。SCNTd和7d的囊胚比率(49．6％、31．3％)高于5d、8d和9d的囊胚比率 力没有显著差异；SCNT胚胎的囊胚形成时间早于IVF胚胎。 关键词：水牛；体外生产胚胎；体细胞核移植胚胎；发育能力 中图分类号：$823．8+3文献标志码：A 文章编号：0529-5130(2013)05．0033—03 中国水牛为沼泽型，体格小，生长缓慢，主要为 Gibco，其他试剂均购自Sigma公司。 役用，产奶性能较低，年均产奶量仅为500～700kg。 1．2卵母细胞的体外成熟 引人河流型乳用水牛品种对中国本地水牛进行了杂交 卵母细胞采集：屠宰场收集水牛卵巢则保存在 改良后，经几十年的研究实践，杂交后代的产奶量可 30℃左右的生理盐水中，4—6h以内运回实验室， 200～2000 10 达1 kg。但由于水牛的繁殖性能低下(初 mL注射器套18G针头吸取水牛卵巢上直径为2～ 情期迟，初产年龄大，产后久不发情，产犊间隔长， 6 受胎率低)，我国水牛杂交改良所需良种种源匮乏， cyte 要突破这个瓶颈，必须集成现代动物繁殖技术。胚胎 法进行，采完2～3头供体后，迅速将回收液送回实 体外生产技术是加快水牛品种改良和缩短繁殖周期的 验室收集COCs。 重要手段之一，而体外胚胎生产方式主要包括体外受 卵母细胞的体外成熟：将注射器抽取的卵泡液直 vitro 接在体视镜下挑选胞质均匀并包裹一层以上卵丘细胞 精(in fertilization，IVF)胚胎生产和体细胞核移 cellnuclear 的COCs。将OPU收集的回收液倒入胚胎过滤杯内， 植(somatic transfer，SCNT)胚胎生产。 本研究旨在通过比较屠宰场卵巢-IVF胚胎、OPU(O． mmol／L vum 出COCs。COCs在含5％FBS和20 pickup)一IVF胚胎以及SCNT胚胎的分裂率、囊 Hepes的 胚率以及囊胚形成时间，分析3种胚胎的发育能力和 LH+0．2mmoL／L 发育速度，为完善水牛体外生产胚胎的超低温冷冻技 10％FBS+5斗g／mLFSH+10斗g／mL 丙酮酸钠+l E2+50iuLmol／L半胱氨酸+25rig／ 术，进一步提高水牛体外生产胚胎冷冻解冻后的胚胎 p。g／mL 成活率提供理论参考。 mL