植物雌激素α-玉米赤霉醇对oxLDL诱导人血管内皮细胞ET-1基因表达影响.pdf

中国协和医科大学博十‘生论文 中的作用。 ⑤采用Western HUVECs ET-1表达中核转录因子AP—l的影响。 4．0【-zAL在oxLDL诱导HUVECs ET-1基因表达中的作用。 影响。 ET-ImRNA表达的影 ②应用RT-PCR技术分析c‘．勘地对oxLDL诱导HUVECs 响。 ③通过瞬时转染分析，观察值．zAL对oxLDL诱导HUVECsET-1基因启动子活 性的影响。 以上实验结果表明： 1．切除卵巢兔食饵性动脉粥样硬化模型主动脉内膜ET-1的表达明显增加， 过对ET-1分泌环节的调节作用，维持内皮细胞的正常功能，防治动脉粥样硬 化的发生发展。 2．oxLDL(351ag／m1)作用HUVECs24h后，可以明恩增加HUVECsET-1的分泌， oxLDL诱导HUvECsET-1表达。 引起的氧应激水平升高的同时，也减弱了oxLDL诱导HUVECsET-1分泌和 表达ET．1的过程中超着重要的作用；a-ZAL通过其抗氧化作用阻断oxLDL 诱导HUVECsROS产生增加，从而进一步降低oxLDL诱导HUVECsET-1 分泌和mRNA的表达以及ET-1启动子的活性。 4．MAPK级联反应可能是ET-I基因表达中极为重要的信号转导途径，ERK的 激活受细胞氧化还原状态影响，Western Blotting实验表明，oxLDL可以诱导 ERK磷酸化的增强，这种被oxLDL诱导的磷酸化可以被旺．zAL、抗氧化剂 中国协和医科大学博士生论文 NAC所减弱，提示氧应激参与ERK磷酸化的进程；MAPK激酶的特异性抑 制剂PD98059可以明显降低oxLDL诱导HUVECsET-1的分泌、mRNA表达 及ET-1启动子的活性，提示MAPK级联反应亦参与此ET-1诱导过程，具有 重要的信号转导作用。 5．人ET-I基因启动子区域含有重要的转录因子AP—l的结合位点，AP-1是核内 反式作用因子，是受细胞氧化还原状态影响的主要转录因子，实验结果表明 该启动子区的AP．1元件在ET-1的转录调节中具有重要作用，oxLDL可以增 加HUVECs c-jun／AP．1蛋白的表达和AP．1报告基因的活性，a-ZAL可抑制 AP一1的激活。 oxLDL诱导的HUVECs ET-1基因表达异常的机制可能存在 通过本研究，发现oxLDL诱导HUVECs 节通路，通过氧应激促进ERK磷酸化进一步激活HUVECs转录因子AP-1，AP—l 与人ET-1基因启动子区域的TRE位点相结合从而诱导ET-1的表达。“·ZAL在 通路中的作用是通过降低活性氧的产生，抑制ERK的磷酸化，减弱HUVECsAP一1 的激活，从而抑制ET-1mRNA的表达和蛋白的分泌。这些发现为n—zAL在血管 内皮细胞保护、抗动脉粥样硬化机制方面提供了有力的依据。 4 中国协和医科大学博士生论文 Influenceof on oxLDL—InducedEndothelin-·1Gene Expression Abstract Clinicaland evidenceshownthat has experimental estrogenreplacementtherapy the r