EDTA抗及菌作用.pptVIP

EDTA介绍 EDTA与有关物质对肠炎沙门氏菌的抑制作用 实验 结论 基本信息 中文名称： 乙二胺四乙酸(EDTA),PT 中文别名： 四乙酸二氨基乙烯,托立龙 英文名称： Ethylenediaminetetraacetic acid 英文别名： (Ethylenedinitrilo)tetraacetic acid,Edathamil 线性分子式： (HO2CCH2)2NCH2CH2N(CH2CO2H)2 分子式： C10H16N2O8 分子量： 292.24 EDTA[1] 性能描述 白色粉末，能溶于氢氧化钠、碳酸钠及氨溶液中，能溶于160℃沸水，微溶于冷水，溶于乙醇、丙酮及部分有机溶剂。 物理参数 熔点：250℃ 用途说明 　　钙离子络合剂，洗涤剂，血液抗凝剂。生化研究中用作钙螯合剂，能消除微量重金属导致的酶催化反应中的抑制作用。 具体研究内容 消化牛乳铁蛋白的胃蛋白酶，包含了抗肠炎沙门氏菌的牛乳铁蛋白活性多肽。这种活性多肽在各种条件下的抗菌活性都得到了研究。这种消化作用比在1%蛋白胨的乳铁蛋白有更大的的抗菌活性，能够杀菌也能增加细菌外膜的通透性（通过在胆盐琼脂上种植细菌得到证明）。抗菌活性在如胰蛋白酶大豆肉汤或以牛奶，大豆为基础的婴幼儿配方牛奶粉这样丰富的媒体中能被抑制。在乳铁蛋白消化中额外加入溶菌酶或EDTA或两者的混合物可以增加混合物的抗菌活性。单独的溶菌酶或EDTA对肠炎沙门氏菌有很少或就几乎没有作用。在乳铁蛋白消化中加入溶菌酶，EDTA能否克服更丰富的外界媒体的影响。 乳铁蛋白 一种与转铁相关的糖蛋白，在很多像中性粒细胞的分泌物中发现。即使它已被广泛研究，其生物学作用仍然不明晰。乳铁蛋白目前可以在牛奶中得到。一报告说一个月大的婴儿母乳喂养，一天可以得到1200毫克乳铁蛋白。乳铁蛋白已经多次被证明在体外有一定的抑菌作用。 溶菌酶 溶菌酶是另一种抗菌剂，可以导致细菌裂解。溶菌酶可以防止疏水抗生素的渗透。在聚阳离子或螯合剂如EDTA对外膜的破坏可以通过细菌对抗菌素，溶菌酶或胆盐的敏感性增加而得到证明。埃里森等人在1990年已经证明乳铁蛋白诱导细菌内毒素的释放，而且钙镁能调节这种影响。 研究目的 本研究的目的是评估牛乳铁蛋白无论是作为食品添加剂或在加工过程中控制细菌污染在食品工业的的潜力。我们要确定在更复杂的媒体中乳铁蛋白活性受限制的程度，并确定我们能否通过加溶菌酶和EDTA来克服复杂媒体带来的限制。 肠炎沙门氏杆菌在50毫升胰酪胨大豆肉汤（TSB）生长，37℃振荡水浴每分钟振荡80次。测试过程中细菌1:1000稀释进一步1:10稀释，最后测5*10^4到1*10^5的CFU数量。此外乳铁蛋白消化多肽被添加到浓度是0.8毫克每毫升的乳铁蛋白中，溶菌酶和EDTA也单独或一起以需要的浓度加入。采用滴板法将10皮升的菌剂滴加到媒体中并在37℃下过夜培养。典型的实验结果呈现出来。 单独的EDTA导致细菌总数在逐步减少，即使影响小，而额外的乳铁蛋白消化多肽（30微克每毫升）和溶菌酶（80微克每毫升）和EDTA一起会有更大的作用。一定浓度的EDTA结合铁蛋白活性多肽，溶菌酶可以从最初接种的水平上阻止细菌数量的增加。 谢谢大家！