小鼠脂肪来源干细胞的分离、培养及鉴定.pdfVIP

内容提要 脂肪来源干细胞（Adipose-DerivedStemCells,ADSCs)作为组织 工程的种子细胞正受到越来越多的关注。 本实验采用一次消化多次收集与差速贴壁法分离小鼠腹股沟及 附睾脂肪组织中的ADSC。通过倒置显微镜观察ADSC的一般形态； 透射电子显微镜观察ADSC 的超微结构；流式细胞术及激光共聚焦 显微镜检测ADSC表面标志；利用特定的诱导液诱导ADSC 分化及 利用扫描电子显微镜观察ADSC与胶原支架的相容性。 结果显示ADSC呈长梭形或成纤维细胞样，旋涡状或束状交叉 生长。ADSC细胞体积大，胞质内含有线粒体及粗面内质网等细胞器。 ADSC 9 的生长符合干细胞的生长规律，并可在体外稳定传至第 代。 ADSC CD44 CD29 CD34 表达 及 ，不表达 。成骨诱导剂诱导后，细胞 内碱性磷酸酶表达量增加，细胞基质发生钙化。成脂肪诱导剂诱导后， 细胞质内可见较多小脂滴。说明ADSC 具有分化为成骨细胞及脂肪 细胞的潜能。ADSC能够在胶原支架上铺展生长，说明其与胶原支架 具有良好的相容性。 本实验建立了分离、培养小鼠ADSC 的技术方法，为将来利用 小鼠ADSC 进行皮肤、肌腱、血管及神经组织修复的动物实验研究 提供了前期实验基础和技术支持。 目录 目 录 目 录 目目 录录 英文缩略词表 ……………………………………………………1 第1章 综述…………………………………………………………2 第2章 材料与方法………………………………………………8 2.1 主要试剂及仪器………………………………………………8 2.2 实验动物………………………………………………………9 2.3 实验方法………………………………………………………10 第3章 实验结果 …………………………………………………18 第4章 讨论 ……………………………………………………… 25 第5章 结论 ………………………………………………………28 参考文献……………………………………………………………29 中文摘要 …………………………………………………………36 英文摘要 …………………………………………………………38 作者简介及科研成果………………………………………………1 致谢…………………………………………………………………2 英文缩略词 英文缩略词表 英文缩写 英文全称 中文名称 ADSCs adiposederivedstemcells 脂肪来源干细胞 BSA bovineserumalbumin 牛血清白蛋白 DMSO dimethylsulfoxide 二甲基亚砜 EDTA ethylenediaminetetraaceticacid 乙二胺四乙酸二钠 FBS fetalbovineserum 胎牛血清 FCM flowcytometry 流式细胞仪 FITC fluoresceinisothiocyanate