一、基础知识: (一)微生物 (二)菌落: 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,就会形成一个肉眼可见的,具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 (三)细菌的营养类型 根据细菌所利用的能源和碳源的不同,将细菌分为两大营养类型。 自养菌:分类?举例? 异养菌: 腐生菌 寄生菌 大部分病原菌 无机C源:CO2、碳酸盐 有机C源:糖类、脂类、有机酸等 天然物质:花生粉饼、石油 维生素 氨基酸 嘌呤、嘧啶 选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的细胞.使之进行繁殖所用的培养基,称为选择培养基. (7)利用只含纤维素为碳源的液体培养基可筛选_________?(8)若筛选尿细菌,则配制的培养基的特点是____________? 例:可以作为硝化细菌碳源?氮源和能源的是A. CO2?NH3?光能 B. (CH2O)、N2、NH3C. CO2、NH3、NH3D. (CH2O)、NH3、N2 例:下表为牛肉膏?蛋白胨培养基的成分列表,据此回答: (6)若培养所用的培养基为平板培养基,将菌种接种到平板上的方法常用的有 _________________________ ? (2009·宁夏?辽宁理综)(1)大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑________?________和渗透压等条件?由于该细菌具有体积小?结构简单?变异类型容易选择?________?___________等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料? (4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状?大小等菌落特征对细菌进行初步的____________?(5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染?对于固体培养基应采用的检测方法是 : 互动探究2-1:关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,下列叙述错误的是( )A.操作顺序为计算?称量?溶化?倒平板?灭菌B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C.待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板D.待平板冷却凝固约5~10min后将平板倒过来放置 《金榜》P181 (1)⑤ 例:抗生素可由微生物产生,具有抑菌作用,能在琼脂培养基中扩散?在筛选产生抗生素的菌种时,先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌,在27℃下培养3天,形成菌落?然后接种乙?丙?丁三种致病菌(图A),继续在同样条件下培养3天,结果如下图B?分析结果,得出的结论是( ) 细菌数目统计方法 显微镜直接计数法 间接计数法 利用细菌(血细胞)计数板在显微镜下计算微生物数量 稀释样品在培养基表面长出菌落,通过统计菌落数推测样品中含的活菌数 (死菌和活菌数量) (活菌的数量) 计算公式:每克样品中的菌株= V C X M 某稀释度平板平均菌落数 涂布平板稀释液体积 X 稀释倍数 某稀释度平板平均菌落数 涂布平板稀释液体积 X 稀释倍数 (设置重复实验;选择菌落数在30~300的平板进行计数) C 尿素? 100mL 0.5g 1g 0.5g 含量 H2O NaCl 蛋白胨 牛肉膏 成分 (1)蛋白胨在培养基中的作用是_____________________ ?(2)要用此材料配制观察细菌菌落状况的培养基,还需添加的成分是________________? 提供碳源?氮源?生长因子 琼脂(或凝固剂) (3)表中各成分含量确定的原则是_________________________________ ?(4)培养基配制好后,分装前应进行的工作是________ ?(5)从配制培养基到培养完成,所采用的预防杂菌感染的方法是___________________________________________ ? 所培养微生物对各营养成分的需要量 调pH 高压蒸汽灭菌?灼烧接种环?酒精棉球擦手?棉塞塞试管口?在火焰旁接种 平板划线法和稀释涂布平板法 温度 酸碱度 易培养 生活周期短 (2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养器皿进行________(消毒?灭菌);操作者的双手需进行清洗和________;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能________________? 灭菌 消毒 损伤DNA的结构 (3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作?多次重复外,还应保证待测样品稀释的________? 比例合适 鉴定(或分类) 将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生 (6)若
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