江苏省常熟市高中生物 D基因工程NA重组技术的基本工具教案 新人教版选修3.docVIP

基因工程NA重组技术的基本工具 教学 过程 教学内容 教学手段 和方法 预期 目标 1.创设情境，引入对基因重组技术工具的学习。 2.学习 “分子手术刀”──限制酶。 3.学习“分子缝合针”──DNA连接酶。4.学习“分子运输车”──基因进入受体细胞的载体。 5.布置作业。 师：1973年转基因微生物──转基因大肠杆菌问世；1980年第一个转基因动物──转基因小鼠诞生；1983年第一例转基因植物──转基因烟草出现，实现了一种生物的某些性状在另一种生物中的表达。 同学们，性状的表达与我们从前学过的什么过程有关？ 生：与基因控制蛋白质的合成有关。 师：假若这是一个DNA上的能指导合成某种药物蛋白的基因(老师用手指出纸条上的该区段)，而这是一条烟草的DNA(老师拿出另一纸条)。同学们分析，要实现药物基因在烟草中的表达，提前要做哪些关键工作？ 生：1. 要将药物基因切割下来； 2. 要将药物基因整合到烟草的DNA上。 师：同学们说得对！但还应该实际考虑问题，这两条纸带所代表的DNA是在同一个细胞中吗？ 生：不是。 师：所以这里就存在一个基因转移的实际问题，谁能具体说一下？ 生：就是如何将控制合成药物的基因转入烟草细胞的问题。 师：同学们思考的问题，正是科学家们思考的问题。刚才我们所探讨的工作，都是在分子水平上进行的，切割也好，连接也好，转移也好，无一例外。中国有句俗语叫“没有金刚钻儿，不揽瓷器活儿”。科学家们在实施基因工程之前，苦苦求索，终于找到了实施基因工程的三种“金刚钻儿”，使基因工程的设想成为了现实。这三种“金刚钻儿”，一是准确切割DNA的工具，“分子手术刀”──限制酶；二是DNA片段的连接工具，“分子缝合针”──DNA连接酶；三是基因转移工具，“分子运输车”──基因进入受体细胞的载体。下面我们就来学习这方面的内容。 师：在进入对限制酶的学习时，你们可能最关心的是这种工具酶到哪里去寻找。我们不妨从以往学过的知识谈起，引起思考。自然界中有各种生物，它们所处的环境不是真空。一些生物的DNA可能进入另一种生物的细胞中。这种可能，同学们可用什么实例来说明？ 生：噬菌体侵染细菌的实验。 师：那么现今存在的生物为什么没有在长期的进化过程中被外源DNA的入侵而绝灭，仍能保持一种稳定状态呢？ 生：生物体有的有免疫系统，如动物；有的有保护作用的组织、器官，如植物。 师：那么作为单细胞的生物来讲，怎么会有那么复杂的结构和系统？它如何来抵抗入侵的外源DNA，保护自身呢？ 生：只有让外来的DNA失效，才能保护自身。 师：那么怎样才能让DNA失效？ 生：用DNA酶，因为在必修课本中学过。 师：用DNA酶，那么生物自身的DNA不也要失效了吗？ 生：一种特殊的酶，能切割外来的DNA，而对自身不切割。 师：根据你们的分析可知，这种酶可能是一种不同于DNA酶的、我们还没有认识的酶。我们讨论至此，同学们是否有了从哪里获得这种酶的意向？ 生：到单细胞的生物中去找。 师：科学家的基本意向也和同学们一样。单细胞生物比多细胞生物更容易受到外源DNA的侵入。在长期的进化过程中，使其必须有处理外源DNA的酶。科学家们经过不懈的努力，终于从原核生物中分离纯化出这种酶，叫做限制酶。迄今已从近300种微生物中分离出4 000种限制酶。这种酶与我们以前知道的DNA酶的作用是不同的。请同学们看书，学习限制酶特有的作用。 师：书中告诉我们这种特殊的酶有什么作用？ 生：它们能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 师：以上这句话，说出了两层意思。一是识别特定核苷酸序列。请同学们看图，EcoRI只能识别GAATTC的核苷酸序列，SmaI只识别CCCGGG的核苷酸序列。第二层意思是从特定部位的两个核苷酸之间切开。请同学们看图，EcoRI就从G和A之间切开，SmaI就从C和G之间切开。 师：刚才我们提到科学家们已经分离出4 000多种限制酶。由于酶的不同，它们识别的特定核苷酸序列也不同，这样就为我们切割DNA提供了多种特定的“手术刀”。但它们切割DNA后形成的末端有两种可能，请同学看图回答。 生：一种形成黏性末端，一种形成平末端。 师：那么这两种末端是如何形成的呢？请从书中找到答案。 生：限制酶在它识别序列的中心位置两侧将DNA两条单链分割开，就形成黏性末端，而从识别序列的中心位置切开就产生平末端。 师：切断的DNA片段要与受体细胞的DNA连接，同学们根据以往学习的经验，能说出用什么酶吗？ 生：用DNA复制中的DNA聚合酶。 师：同学们想到用DNA聚合酶是很正常的，但是现在我们学习的这种连接与DNA复制中的连接有所不同。请看书后议论，由同学来回答。 生：DNA连接酶是将双链的DNA片段连接起来，而DNA聚合酶则是将一个个脱氧核苷酸连