.苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium+meliloti)的耐酸性研究.pdfVIP

第30卷第1期 西南大学学报(自然科学版) 2008年1月 V01．30NO．1 ofSouthwest Science Journal University(NaturalEdition) Jan． 2008 文章编号：1673—9868(2008)01—0091—07 苜蓿中华根瘤茵(Sinorhizobium meliloti) 的耐酸性研究 张学军， 张磊， 张 琴， 石 杰， 曹良元， 代先祝， 魏世清， 李艳宾， 苏海锋 西南大学资源环境学院，重庆400716 摘要：用来自酸性土壤上紫花苜蓿根瘤中分离得到的3株能在pH4．8的YMA固体培养基上正常生长的根瘤茵 进行回接试验和生长曲线测定，结果证明，茵株91532耐酸能力高于其余茼珠，并高于国内外已报道过的苜蓿根瘤 质子通量试验中，与酸敏感茵株相比，91532细胞膜具有较强的阻挡质子能力，细胞具有较高的存活率，耐酸能力 具有遗传稳定性． 关键词：苜蓿中华根瘤茵；耐酸f16SrRNA；扫描电子显微镜；质子通量 中图分类号：S154．32；S154．34 文献标识码：A sativa 紫花苜蓿(MedicagoL)是一种适IZi性好、营养价值和可开发价值很高的牧草[1．21．但是，紫 花苜蓿因其对酸的极其敏感性导致在南方的种植受到限制．在我国，酸性土壤总面积为2．03×107hmz， 酸性土壤的面积仍在不断扩大[1]．接种根瘤菌可以促进苜蓿在酸性土壤上的种植‘5。，20世纪80年代开始， 澳大利亚根瘤菌研究中心(CRS)已经分离获得了若干株耐酸苜蓿根瘤菌，它们能使较多的苜蓿属植物在 pH=5．0的土壤上结瘤并能维持较高的产量[6’7]．目前已报道的耐酸苜蓿根瘤菌菌株的耐酸性有限．因此， 筛选和培育耐酸苜蓿根瘤菌将有助于扩大紫花苜蓿在我国南方的种植． 本研究室分离酸性土壤上生长的紫花苜蓿的根瘤，从中筛选出了3株能在pH=4．8的YMA固体培养基 描电子显微镜分析和质子通量试验．结果证明，菌株91532及其所代表菌株为耐酸的苜蓿中华根瘤菌(Sino— rhizobium meliloti)，并具备耐酸菌株在酸性环境中的菌体和细胞膜透性特征．因此，本研究不仅筛选到较耐酸 的苜蓿根瘤菌菌株，而且所使用方法也对耐酸微生物的分离筛选有一定借鉴意义． 1材料与方法 1．1材 料 1．1．1供试茵种 苜蓿根瘤菌91512，91522和91532分离自重庆市北碚区缙云山(海拔650 m)酸性(pH=5．2)土壤中的 收稿日期：2007—09—24 基金项目I国家“973”基金资助项目(001cBl08905)． 作者简介：张学军(1981一)，男，内蒙古人，硕士研究生，主要从事于农业微生物研究． 通讯作者；张磊，博士，硕士研究生导师． 万方数据 92 西南大学学报(自然科学版) 第30卷 紫花苜蓿根瘤；96489(酸敏感的苜蓿根瘤菌)菌株取自中国农业大学微生物资源与应用重点实验室，分离 sativa 自新疆沙湾，宿主为M L，该菌株在pH=5．0YMA固体和液体培养基上均不能生长，能够耐受2％ 的NaCI，是1株较为典型的耐盐碱菌株． ‘ 1．1．2培养基 ， 0．5