微生物实验室建设摘要.ppt

无菌操作技术 基本要求与无菌技术 临床细菌分离培养 接种环及接种针 设施和设备：为达到无菌技术要求而建立的细菌接种场所。 接种和分离方法： 平板划线分离法： 连续划线分离法（含菌量少的标本） 分区划线分离法（含菌量多的标本） 棋盘划线分离法（含菌量多的如：大便标本） 接种基本条件 斜面接种法 穿刺接种法 液体接种法 倾注平板法 涂布法 自动接种法 接种分离方法 血平板 巧克力平板 麦康凯或中国蓝平板 沙保弱琼脂平板或真菌显色平板 SS平板 培养基的选择 标本类型 接种平板 痰液 BAP、CAH、SDA 脑脊液 BAP、CA、SDA、肉汤 胸腹水（其它无菌穿刺液）、引流液 BAP、SDA、肉汤 尿液 BAP（10ul半定量接种） 粪便 SS、MAC、BAP 目前流行XLD+EMB 分泌物（脓液） BAP、SDA 咽拭子 BAP 宫颈分泌物（阴道分泌物） BAP、SDA 需氧培养法：又称普通培养法 二氧化碳培养法（肺链、脑膜炎奈瑟、嗜血杆菌属等） 微需氧培养法（5%氧气、10%二氧化碳、85%氮气的气体环境） 厌氧培养法 培养的方法和条件 通过分纯获得待鉴定细菌的纯培养物 形态与染色：革兰染色分为四类 根据染色性和菌体形态选择鉴定系统；手工法或商品化鉴定系统等 细菌鉴定 国外：手工鉴定系统API、Micro-ID、BD等 国内：珠海DL等 商品手工鉴定系统 双相血培养瓶 商品化人工血培养系统 自动化血培养系统 全自动微生物鉴定和药敏分析系统 结核分枝杆菌快速检测系统 教科书 其它工具书 推荐的书籍 要想当一名合格的临床微生物学人 坚实的基础 执着的精神 耐的了寂寞 把每一个细菌都当成是恋人，了解它到细微处！ “与临床密切沟通联系，因为我们共同面对的是另一类地球生物---微生物” 个人感想： Thanks！ 微生物实验室 颜小平 自贡三院 1.生物安全防护实验室 在以微生物为实验（检测）对象的实验工作中，针对微生物危害程度建设的可以预防生物危害，保障工作人员自身和临近安全的实验室称为生物安全防护实验室。 生物安全防护三原则 实验室生物安全防护的内容包括： 安全设备、个体防护装置和措施（一级防护） 实验室的特殊设计和建设要求（二级防护） 严格的管理制度和标准化的操作程序和规程 术语和定义 2.1 生物因子　biological agents 一切微生物和生物活性物质 2.2 病原体 pathogens 可使人、动物或植物致病的生物因子。 2.3 危险废弃物 hazardous waste 有潜在生物危险、可燃、易燃、腐蚀、有毒、放射和起破坏作用的对人、环境有害的一切废弃物。 2.4 危害 risk 伤害发生的概率及其严重性的综合。 2.5 气溶胶 aerosols 悬浮于气体介质中的粒径一般为0.001μｍ－100μｍ的固态或液态微小粒子形成的相对稳定的分散体系。 2.6 生物安全 biosafety 避免危险生物因子造成实验室人员暴露、向实验室外扩散并导致危害的综合措施。 2.7 高效空气过滤器 high efficiency particulate air filter(HEPA) 通常以滤除大于等于0.3μｍ微粒为目的，滤除效率符合相关要求的过滤器。 2.8安全罩 safety hood 置于实验室工作台或仪器设备上的负压排风罩，以减少实验室工作者的暴露危险。 2.9生物安全柜 biological safety cabinet(BSC) 负压过滤排风柜。防止操作者和环境暴露于实验过程中产生的生物气溶胶。 2.10个人防护装备 personal protective equipment(PPE) 用于防止人员受到化学和生物等有害因子伤害的器材和用品。 2.11 实验室分区 laboratory area 按照生物因子污染概率的大小，实验室可进行合理的分区。 2.12 缓冲间 buffer room 设置在清洁区、半污染区和污染区相临两区之间的缓冲密闭室，具有通风系统，其两个门具有互锁功能，且不能同时处于开启状态。 2.13 气锁 air lock 气压可调节的气密室，用于连接气压不同的两个相邻区域，其两个门具有互锁功能，不能同时处于开启状态。在实验室中用作特殊通道。 危害程度分级 根据生物因子对个体和群体的危害程度将其分为4级。 危害等级Ⅰ（低个体危害，低群体危害） 不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等生物因子。 危害等级Ⅱ（中等个体危害，有限群体危害） 能引起人或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会