吉林大学白求恩医学院 分子生物.pptx

基因克隆、克隆基因的表达吉林大学白求恩医学院 分子生物学教研室 讲 师 孙 巍Tel: 0431 - 856193692012-10基因克隆趣闻荧光蛋白基因克隆猫 科学家复活冰冻死老鼠修正基因蚊子防控疾病基因转换让蝌蚪长出三颗眼睛基因克隆胚芽造就健康婴儿猿猴病毒DNA?噬菌体DNA限制性内切酶限制性内切酶Paul Berga biochemistry at StanfordDNA连接酶重组DNA分子?分子生物学关键的技术突破： DNA重组技术1972年，世界上第一个重组DNA分子诞生1980年，获诺贝尔化学奖 moleculeDNA cloneCell colonyorganism克隆：通过无性繁殖过程所产生的及亲代完全相同的子代群体。基因克隆: 是指来自不同生物的基因同有自主复制能力的载体DNA在体外人工连接，构建成新的重组DNA，然后送入受体生物中去表达，从而产生遗传物质转移和重新组合。 DNA克隆的过程包括五个基本部分：一、目的DNA的分离获取（分）；二、载体的选择及准备（择）；三、目的DNA及载体连接（接）；四、重组DNA转入受体细胞（转）；五、重组体的筛选及鉴定（筛）。 一、目的DNA的分离获取（分）分离获取目的DNA有多种方法：(一) PCR——待扩增目的基因两端序列已知（据此设计引物）(二) 基因文库——先构建，后筛选(三)化学合成法——直接合成目的DNA（序列