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HEREDITAS (Beijing) 2012 10 , 34(10): 1291―1297
ISSN 0253-9772 研究报告
DOI: 10.3724/SP.J.1005.2012.01291
猪Gli1 基因的克隆、表达谱分析及脂肪组织特异性表
达载体的构建
1 1 2 1
林佳丽 , 沈良才 , 潘登科 , 张瑾
1. , 066600;
2. , , 100193
Hedgehog(Hh)信号通路对动物脂肪沉积具有抑制作用, 并且从果蝇到脊椎动物具有高度保守性, 但在家
猪研究中鲜见报道。文章选择家猪Hh 通路的转录激活因子Gli1 进行研究, 通过RT-PCR 结合RACE 技术, 首
次获得家猪Gli1 基因cDNA 全长, 利用Real-time PCR 对家猪Gli1 基因在不同组织中的表达丰度进行了分析,
并构建了真核表达载体和脂肪组织特异性表达载体。结果表明：猪Gli1 基因cDNA 全长3 576 bp, 基因组序列
全长 10 715 bp, 共 12 个外显子, 编码 1 106 个氨基酸。生物信息学分析表明, 猪 Gli1 为不稳定亲水性蛋白, 不
具有跨膜结构域和信号肽序列, 但具有锌指结构与核定位序列。对7 个物种的Gli1 蛋白序列和基因组序列相似
性进行分析, 发现各物种间序列相似性均在80% 以上, 说明 Gli1 在物种间高度保守。组织表达谱分析表明, Gli1
仅在成体猪舌组织中表达; 在家猪脂肪组织发育进程中, Gli1 仅在出生 1 周的猪脂肪组织中检测到微弱表达,
但 1 月龄及3 月龄猪脂肪组织中均检测不到表达, 由此推断猪Gli1 表达与脂肪组织发育呈负相关。最后, 将猪
Gli1 编码区克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP, 体外转染实验证明该载体能够正确表达猪 Gli1, 另外还构建了
脂肪组织特异性表达载体, 为构建脂肪组织特异性转基因动物奠定基础。
猪; 脂肪沉积; Gli1; 基因克隆
Molecular cloning, expression profile analysis and construction of
adipose tissue specific expression vector of pig Gli1 gene
1 1 2 1
LIN Jia-Li , SHEN Liang-Cai , PAN Deng-Ke , ZHANG Jin
1. College of Life Science and Techonolgy, Hebei Normal University of Science Technolgoy, Qinhuangdao 066600, China;
2. Key Laboratory Farm Animal Genetic Resources and Germplasm Innovation, Institute of Animal Sciences , Chinese Academy of Agricul-
tural Sciences, Beijing 100193, China
收稿日期: 2012−05−31; 修回日期: 2012−08−05
基金项目: (C2009000871)
作者简介: , , Tel E-mail: linjl010@163.com
, , :Tel: E-mail: ipwyje918@163.com
通讯作者: ,
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