大鼠成骨细胞在聚乳酸、马来酸酐改性聚乳酸表面的粘附性能研究.pdfVIP

维普资讯 生物化学与生物物理进展 Pr0g．Biod~em．Biophys． 大鼠成骨细胞在聚乳酸、马来酸酐改性聚乳酸 表面的粘附性能研究 潘 君 王远亮” 曹雪玻 苏 兰 秦 建 卢 晓 蔡绍皙 (重庆大学生物工程学院，生物力学 组织工程教育部萤 实验毫 重庆 400044) 摘要 采用磁管吸吮装置耐大鼠成骨细胞 ，在聚乳酸和马来酸酐改性聚乳酸材料表面的粘附性能进行了研究． 目的是评价材料的粘附性能和改性方法，并筛选材料．研究表明：与玻璃材料相 比，成骨细胞在聚乳酸表面的 粘附力更大，经化学结构改性后．聚乳酸对成骨细胞 24h的粘附性能提高了近 2倍 成骨细胞在改性聚乳酸材 料表面的24h组的粘附力是 15min组的13倍 (测量时间为 3h)，而在聚乳酸上则差别不明显 实验证实，改 性聚乳酸是一种更利于成骨细胞粘附的支撑材料，采用的改性方法可行 关键词 聚乳酸，改性，成骨细胞 ，粘附性能 学科分类号 Q954．6-33 1 聚乳酸在组织工程方面有着广阔的应用前景． 谷氨酰胺购 自Sigma公司． 作为组织工程支撑材料 ，除了要求它具有 良好的生 1．2 方法 物相容性、易加工成三维多孔结构和在某些应用中 1．2．1 聚乳酸、马来酸酐改性聚乳酸薄膜的制备： 的力学性能外，更要求它能够支持 目标细胞的粘 用乙酸乙酯溶解使形成 50g／i的溶液，并用 0．5 附、生长和分化功能．可以这厶／说，组织工程成功 raoL／L的NaOH中和改性聚乳酸溶液．将溶液滴于 的关键之一就在于细胞在支撑材料表面的粘附程 自制的玻璃小腔中 (在载玻片上粘一段约 20n一 度．因此定量研究细胞在支撑材料表面上的粘附性 ×2Omm×20Tilm塑料针筒，用小刀从上到下切一 能不仅可以作为表征组织工程材料的一个重要指 段形成90。的断裂带，其下方留2mm的距离)，待 标，还可以作为筛选材料的一种重要手段 溶剂挥发后，放于紫外灯下灭菌备用． 材料的表面特征，包括它的Top结构、化学 1．2．2 大鼠成骨细胞的培养：采用贴壁法，将 1 性质，表面能都对细胞的粘附性能有影响．其中， ～ 2天龄的大鼠头盖骨取下，充分洗去血污并剥去 采用化学方法改性，调控细胞在材料上的粘附性能 骨膜后，用眼科剪修成约 11TII~I×1Film 的碎块， 在许多细胞工程和组织工程中有着巨大的应用潜 置于培养瓶中 贴壁 12h后加液培养，培养液 由 力[2· ． DMEM-F 20％小牛血清，10u／L胰 岛素， 聚乳酸是可生物降解的材料，细胞的粘附性能 0．3g／Lr奋，氮酰胺组成 约 3d后可见细胞，经检 不仅与它的表面化学性质有关，还与它的本体化学 验为成骨细胞 结构有关l4j．本文 以大 鼠成骨细胞为种植细胞， 1．2．3 粘附性能测定：将原代成骨细胞接种在表面 选择本实验室合成的聚乳酸和经过化学结构改性的 为不同材料的小腔内，按培养细胞相同的成分加液， 聚乳酸为研究对象，采用微管吸吮装置l6研究了 在培养箱中经15min和 24h的孵化后，采用微管吸 细胞在材料表面接种 15min和 24h的粘附性能 吮装置测量单个细胞的粘附性能．测量时问为 3h 实验，以没有涂覆材料的玻璃为对照．微管吸吮测 1 材料与方法 量系统由三部分组成：微管拉制系统、微操作系统 1．1 材料 和数据处理系统．图1为微操