第二节植物细胞对溶质的吸收.docVIP

? 　　植物细胞可以从环境中吸收溶质,这个环境可以是植物生存的外部环境,如土壤,也可以是植物本身的内部环境,即一个细胞的周围组织。 　　当植物根内部的溶质浓度较低,从外部溶液吸收溶质时,首先有一个溶质迅速进入根的阶段，称为第一阶段,然后溶质吸收速度变慢且较平稳，这称为第二阶段(图3-2)。在第一阶段溶质通过扩散作用进入质外体,而在第二阶段溶质又进入原生质及液泡。如果将实验材料从溶液中取出再转入水中,则进入组织的溶质只有很小一部分会很快地泄漏出来,这就是原来进入质外体的部分。如果处于无O2、低温或用抑制剂来抑制呼吸作用,则第一阶段的吸收基本上不受影响,而第二阶段的吸收会被抑制(图3-2)。这些事实表明,溶质进入质外体与其跨膜进入细胞质和液泡的机制是不同的。前者是由于扩散作用而进行吸收,这种不需要代谢来提供能量的???电化学势梯度吸收矿质的过程称为被动吸收(passive absorption)。后者要利用呼吸释放的能量才能逆电化学势梯度吸收矿质，这种过程称为主动吸收(active absorption)。  　　图3-2 植物组织对溶质的吸收 　　 植物细胞吸收矿质元素的方式主要有二种类型:被动吸收和主动吸收。 一、被动吸收 　　(一)扩散作用 　　扩散作用是指分子或离子沿着化学势或电化学势梯度转移的现象。电化学势梯度包括化学势梯度和电势梯度两方面,细胞内外的离子扩散决定于这两种梯度的大小，而分子的扩散则决定于化学势梯度或浓度梯度。 　　设细胞内的离子浓度为ai，膜电势为Ei，电化学势为μi；细胞外的离子浓度为a0，膜电势为Eo，电化学势为μo。根据电化学势差的表达式(2-10)，细胞内外的电化学势差为  (3-4)式就是著名的楞斯特(Nernst)方程式，表示了膜电势差和膜内外离子活度(浓度)间的关系，也就是说膜电势差与膜内外离子活度比的对数成正比。如仅研究分子扩散，(3-1)式中电势梯度项可视为0，  图3-3测定细胞膜电势差的示意图 　　微电极插入细胞内，而面积大的参比电极安放在细胞外，二极间的电势差由静电计测量，电势差经放大器放大后由记录仪记录 　　  　　典型的植物细胞,在细胞膜的内侧具有较高的负电荷,而在细胞膜的外侧具有较高的正电荷。假设细胞从环境中吸收了较多的阳离子,而致使细胞内该离子浓度较高。按照化学势梯度,细胞内的阳离子应向外扩散;而按电势梯度,由于细胞内有较高的负电荷,则这种阳离子又应该从细胞外向内扩散。那么离子究竟向什么方向扩散呢?这要取决于化学势梯度与电势梯度相对数值的大小。细胞的膜电势可用由微电极、参比电极和高灵敏度的电位计组成的测定装置(图3-3)测定。微电极是由玻璃毛细管打制而成，尖端口径仅为1μm，能刺入细胞内部，微电极内放入电解质和金属导线。参比电极安放在细胞外。当微电极刺入细胞质，测定到的是质膜内外的电势差；如刺入液泡，测量值就代表液泡和细胞外部之间的电势差。 　　(二)协助扩散 　　协助扩散(facilitated diffusion)是小分子物质经膜转运蛋白顺浓度梯度或电化学梯度跨膜的转运。膜转运蛋白可分为两类:一类是通道(channel)蛋白,另一类是载体(carrier)蛋白。 　　1.离子通道(ion channel) 离子通道被认为是细胞膜中一类内在蛋白构成的孔道。可为化学方式或电学方式激活，控制离子通过细胞膜顺电化学势流动。 　　膜片钳(patch clamp，PC)技术的应用,极大地推动了对离子通道的研究。所谓膜片钳技术，是指使用微电极从一小片细胞膜上获取电子学信息的技术，即将跨膜电压保持恒定(电压钳位)，测量通过膜的离子电流大小的技术。进行PC测定，需要用经过热抛光的尖端为1μm的玻璃微电极,压向清洁的膜表面,探截一小块膜,有时还需施以适当的吸力，目的是形成高阻封接。微电极中先灌适当的盐溶液，使通过细胞膜片的电流流入微电极。流入微电极的电流与探截膜片上的通道数目和开放状况以及通过的离子种类有关。微电极与高分辨力的放大器连接,根据记录到的电讯号,可推测离子通道的情况(图3-4)。膜片钳技术的试验材料往往是分离的原生质体或细胞器,这样可以避免细胞间的联系与多种细胞器的干扰,以便在较简单的环境中测定膜上通道特性。PC技术主要被用来分析膜上的离子通道，借此还可用来研究细胞器间的离子运输、气孔运动、光受体、激素受体以及信号分子等的作用机理，应用范围十分广泛。发明此技术的E.Neher和B.Sakmann荣获了1991年诺贝尔医学生理奖。  ? 　　图 3-4膜片钳技术测定离子通道示意图 　　A.测定原理与装置：a.测定原理图，在玻璃微电极尖端截取的膜片上，如有开放的离子通道时，离子通过通道进入微电极，产生的电流经放大器放大后，由