减毒痘苗病毒天坛株的构建、致病性及免疫原性研究.pdf

中文摘要 减毒痘苗病毒天坛株的构建、致病性和免疫原性研究 痘苗病毒天坛株作为疫苗，在我国消灭天花的历史上居功至伟。近年来，痘 苗病毒天坛株作为活病毒载体在预防艾滋病、狂犬病和流感等传染病方面取得了 巨大成就。然而，颅内接种实验表明，痘苗病毒天坛株对小鼠的致死率较高，具 有一定的神经毒性。临床接种痘苗病毒天坛株疫苗也可能导致少数接种者出现严 重副作用，例如脑炎、结膜炎、心肌炎及全身性发痘等。因此，如何构建更加低 毒、更加安全且高效的痘苗病毒天坛株疫苗或载体成为研究的热点。 通过同源重组和 Cre-LoxP 技术，定点敲除痘苗病毒基因组中的复制非必需 基因，是构建减毒疫苗或载体的有效方法。基因重组作为基因工程的重要技术之 一，包括同源重组、位点特异性重组以及转座重组。同源重组技术，又叫基因打 靶技术，是目前研究痘苗病毒基因功能、构建减毒型痘苗病毒疫苗和载体的主要 方法。该技术通过构建含有左右重组臂、启动子和筛选标记基因的穿梭载体，使 病毒基因组与外源 DNA 序列发生重组，进而定点修饰或缺失基因组上某一目的 基因，构建缺失型痘苗病毒。进而，通过体外和体内实验对缺失型痘苗病毒的生 长动力学、病毒粒子表型、细胞间传播能力、毒力、宿主范围和免疫原性等特性 进行系