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细胞中微量元素含量测定
原子吸收光谱法测定细胞
中微量元素
原子吸收光谱分析
基本原理
基于从光源辐射出待测元素的特征谱线的
光,通过试样蒸气时,被蒸气中待测元素的基
态原子所吸收,根据特征谱线的光减弱的程度
来测定试样中待测元素含量的方法。
共振线:在原子吸收光谱中能被基态原子吸收的谱线。
2015/4/21
工作原理示意图
原子化器 高压电源
光源(空心阴极灯)
单色器 放大器 读数器
光源 光电倍增管
试样 分光系统
燃料气
检测系统
载气
单光束原子吸收光谱仪示意图
2015/4/21
光的吸收定律
I
0
A = log = k N l
I
A — 吸光度;
I — 光源所发射的待测元素“共振线”的强度;
0
I — 被火焰中待测元素吸收后的透光强度;
k — 原子吸收系数;
l — “共振线”所通过的火焰长度;
N — 蒸汽中基态原子的浓度;
A = k C
(原子吸收光谱进行定量分析的基本公式)
2015/4/21
原子吸收光谱仪
2015/4/21
原子吸收分光光度计
2015/4/21
自动进样器
2015/4/21
方法特点及应用
(1)干扰少准确度高
(2)仪器简单操作方便
(3)灵敏度高
(4)测定元素范围广
应用:痕量分析
冶金、地质、采矿、石油、化工、环境保护、
医药卫生等
2015/4/21
实例
火焰原子吸收光谱法测定淋巴细
胞中微量的铜和锌
1. 淋巴细胞的分离
抽取外用静脉血3.0 ml 以等渗氯化理溶液4׃1稀释后 以
Ficoll分离液分离淋巴细胞 以转速2000 rpm 分离30
min 。将分离的淋巴细胞层吸出 加4倍等渗氯化锂后以
转速1500 rpm 离心分离10 min 弃去上清液 加1.0 ml
超纯水轻轻振摇1 min 即加高渗氯化锂1.0 ml 振摇1
min 再加等渗氯化锂 清洗3遍 每次离心10 min 。用
等渗氯化锂0.12 ml加入经离心沉淀的淋巴细胞中轻轻振
摇 使其成为均匀的悬浮液 从中吸取0.02 ml计数 另
吸出0.1
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