信号核酸识体用于药物托普霉素的高灵敏度检测.pdfVIP

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信号核酸识体用于药物托普霉素的高灵敏度检测.pdf

VOI. 27 高等学校化学学报 NO. 5 2 0 0 6 年5 月 CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES 826 ~ 829 信号核酸识体用于药物托普 霉素的高灵敏度检测 1,2 2 2 2 1 2 周翠松 ,江雅新 ,汪 俊 ,麻宝成 ,李梦龙 ,方晓红 (1. 四川大学化学学院,成都610064 ;2. 中国科学院化学研究所,北京100080) 摘要 提出了一种利用RNA 核酸识体和光开关化合物[Ru (phen ) 2 + 2 dppz ] (RU )高灵敏检测药物分子的荧 光分析新方法. 以托普霉素(TOB )为靶分子,检测限可达到10 nmOI / L,同时该方法有较好的选择性,能在 溶液中实现无需分离的实时检测. 这种无标记检测方法有利于不稳定RNA 核酸识体在分析检测中的应用, 简化实验操作,为其它药物分子的检测提供了新思路. 关键词 核酸识体;托普霉素;荧光光谱法;光开关化合物;核糖核酸 05-0826-04 中图分类号 O657. 31 文献标识码 A 文章编号 0251-0790 (2006 ) 核酸识体(Aptamer )是近年来发展起来的一类经体外人工进化程序筛选出的寡聚核苷酸,因其能 高效、特异地结合各种配体,具有易合成、易储存和易修饰等优点,在医学诊断治疗、药物分子设计以 及分析检测等方面的应用已引起了人们的极大关注[1] . 发展无需分离洗脱样品且在均相溶液中快速实 时检测混合组分中靶分子的信号核酸识体是目前较为活跃的研究方向. 信号核酸识体通常是标记一个 [2 ] 或两个荧光基团的核酸识体,利用它与靶分子结合时荧光信号的变化可实现靶分子的检测 . 然而要 使核酸识体的荧光标记不影响它与配体的结合,标记位点往往难以确定;同时已筛选出的大部分核酸 识体都是RNA ,其自身的不稳定性给荧光标记带来一定的困难. 最近我们研究出了利用DNA 光开关 2 + 化合物[Ru(phen )dppz ] (RU )与核酸识体复合物作为信号核酸识体的新方法,该法无需对核酸识体 2 [3 ,4 ] 进行荧光基团标记,成功地实现了蛋白质大分子和ATP 小分子的检测 . 本文进一步利用这种信号 核酸识体的原理,建立了检测药物分子托普霉素的高效简便方法. 托普霉素[TOB ,结构见图1(A )]是广谱氨基糖苷类抗生素之一,常用于治疗恶性革兰氏感染. 由 于这类氨基糖苷类抗生素具有潜在的耳毒性和肾毒性,对它的检测在药物研究中备受关注[5 ~ 10 ]

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