利用亮甲酚蓝染色法预测牛卵母细胞发育潜能的研究.pdfVIP

利用亮甲酚蓝染色法预测牛卵母细胞 发育潜能的研究 乔利敏1，李向臣4，乔富强2姚华3，张文秀4，关伟军4，马月辉4 1.北京农业职业学院畜牧兽医系，北京 102442;2.北京农学院科技产业集团，北京 102206; 3.北京农学院动物科学技术学院，北京 102206;4.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193 摘要:利用亮甲酚蓝(Brilliantcresylblue，BCB)对牛未成熟卵母细胞进行染色，根据染色结果的不同对牛未成熟 卵母细胞进行分组培养，观察不同组间卵母细胞发育潜能与细胞凋亡的差异，探讨以BCB着色判定牛卵质量的可 行性 。本试验在牛卵母细胞成熟培养前用26μmol·L-1BCB染色90min作为处理组(BCB+和BCB-)，以未染 色卵母细胞作为对照组;以卵内谷胱甘肽的浓度作为胞质成熟的判定指标，以卵母细胞体外受精后囊胚率作为卵 子发育能力的判定指标，同时参照卵母细胞的凋亡检测，综合评定卵子的质量。结果表明:(1)着色组(BCB+)卵母 细胞成熟率与对照组和无色组(BCB-)间差异显著(P＜0.05);(2)成熟卵母细胞中谷胱甘肽的浓度较培养前差异 显著(P＜0.05);(3)经BCB染色，卵母细胞在成熟后，BCB+组的成熟率、凋亡率较对照组、BCB-组差异显著(P＜ 0.05);(4)体外受精后，BCB+组的囊胚率和囊胚细胞数较对照组和BCB-组差异显著(P＜0.05)。由此可见，牛 卵母细胞经BCB的染色选择可以作为判断卵母细胞未来发育潜能的一个标记。 牛;卵母细胞;BCB;发育潜能 S823;S852.1 A 0366-6964(2011)09-1249-07 PredictionofBovineOocyteDevelopmentalCapacitybyBrilliantCresylBlue(BCB) StainingofCOCs QIAOLi-minLIXiang-ehenQIAOFu-qiang YAO Hua ZHANG Wen-xiuGUANWei-jun MAYue-hui 2010-09-26 国家自然科技平台建设项目(2005DKA21101);“863”课题(2006AA102198) 乔利敏(1972-)，女，山西河曲人，硕士，讲师，主要从事繁殖与胚胎工程研究，Tel:010773，E-mail:liminqia071@163.com PI)匹配使 图 1 B 著(P＜0.05)。 表 4 @@[1] GORDONⅡ.Recoveringthebovineoolite.In: LabomteryProductionoiCattleEmbryos(Biotech nolngyinAgricultureNo.27)[M].2nded.Cam bridge,UK:CABInternational/CambridgeUniver opmentofIVM-IVFprepubortaigoatoocytes[J].Zy sityPress,2003:79-111. gote,2003,11(2):131-138. @@[2]乔利敏，黄成定，李向臣，等.亮甲酚蓝染色对牛卵母 @@[12] URDANETAA , JIMENEZ-MECEDO A R, IZQI 细胞体外成熟的影响[J].中国畜牧兽医，2009，(2): ERDOD,etal.Supplementationwithcysteamine 82-85. duringmaturationandembryocultureonembryode @@[3]乔利敏，黄成定，李向臣，等.亮甲酚蓝染色对未成熟 velopmentofprepubertalgoatoocytesselectedbythe 牛卵母细胞体外成熟体外受