第2章 纯培养与显微技术.ppt

四、单细胞（孢子）分离 一般采用显微操作仪，在显微镜下进行； 操作难度与细胞或个体的大小成反比； 参见P17～18 通过机械、空气或油压传动装置来减小手的动作幅度， 在显微镜下用毛细管或显微针、钩、环等挑取单个 微生物细胞或孢子以获得纯培养。 利用刚才介绍的技术，我们是否有可能获得某一个生态环境（例如1克土壤）中所有种类细菌的纯培养？ 假设待分离的细菌均能利用某一相同的培养基生长 同一生态环境中混杂存在着不同种类的细菌； 不同细菌在数量存在差异； 微生物在自然条件下存在的特点： 五、选择培养分离 抑制大多数其它微生物的生长； 使待分离的微生物生长更快； 使待分离的微生物在群落中的数量上升， 方便用稀释法对其进行纯化。 微生物群落中数量占少数的微生物的分离纯化： 没有一种培养基或一种培养条件能够满足自然界中一切微生物生长的要求，在一定程度上所有的培养基都是选择性的。 （ P18 第2大段） 使待分离的微生物生长“突出”； 直接挑取待分离的微生物的菌落获得纯培养。 参见P18 五、选择培养分离 1. 利用选择培养法进行直接分离 待分离的微生物生长，其它微生物的生长被抑制 高温下培养：分离嗜热细菌； 培养基中不含N：分离固氮菌； 培养基加抗生素：分离抗性菌； 参见P18 五、选择培养分离 1. 利用选择平板进行直接分离 待分离的微生物的生长特征明显不同于其它微生物 牛奶平板：分离蛋白酶产生菌； 参见P18 五、选择培养分离 2. 富集培养 从自然界中分离到所需的特定微生物 特定的环境条件 仅适应于该条件的微生物旺盛生长 待分离微生物在群落中的数量大大增加 参见P18 2. 富集培养 富集培养是微生物学家最强有力的技术手段之一。营养和生理条件的几乎无穷尽的组合形式可应用于从自然界选择出特定微生物的需要。 （ P 19，第二段） 根据微生物的特殊要求，从自然界分离出特定已知微生物种类； 分离培养在特定环境中能生长的微生物； 参见P18 七、微生物的保藏技术 （移到第八章 微生物遗传） 微生物个体微小的特点也决定了显微技术是进行微生物研究的另一项重要技术，因为绝大多数微生物的个体形态及其内部结构只能通过显微镜才能进行观察和研究。 （P12第一段） 微生物的基本特点： 小！ 参见P13 第二节 显微镜和显微技术 几个基本概念： 放大 分辨率 反差 被观察物越小，放大倍数应越大，否则难以看清！ 特定条件下能辨析的两点之间的最小距离 被观察物区别于背景的程度 被观察物区别于背景的程度 与显微镜的自身特点有关，但也取决于进行显微观察时对显微镜的正确使用及良好的标本制作和观察技术，这就是显微技术。 P21 倒数第一段 参见 P 21 100% 200% 800% * * 第2章 纯培养和显微技术 南京工业大学生物与制药工程学院 蔡恒 微生物的基本特点： 小！ 在绝大多数情况下都是利用微生物的群体来研究其属性； 微生物的物种（菌株）一般也是以群体的形式进行繁衍、保存； 培养技术在微生物学中具有重要意义！ 参见P13 在研究中所使用的微生物培养群体： 培养物：在一定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体 混合培养物：含有多种微生物的培养物； 纯培养物： 只有一种微生物的培养物； 通常情况下只有纯培养物才能提供可以重复的结果 纯培养技术是进行微生物学研究的基础！ 参见P13 微生物个体微小的特点也决定了显微技术是进行微生物研究的另一项重要技术，因为绝大多数微生物的个体形态及其内部结构只能通过显微镜才能进行观察和研究。 （P12第一段） 微生物的基本特点： 小！ 参见P13 第一节 微生物的分离和纯培养 无菌概念、纯培养概念、纯培养物的获得方法 第二节 显微镜和显微技术 各种显微镜的基本原理及其样品制备方法 第一节 微生物的分离和纯培养 从混杂的群体中分离特定的某一种微生物， 是研究和利用微生物的第一步。 一、无菌技术 用于分离、培养微生物的器具事先不含任何微生物； 在转接、培养微生物时防止其它微生物的污染，其自身也不污染环境； （P14第1段） （参见P13、14） 一、无菌技术 参见P14 一、无菌技术 参见P14 1、微生物培养的常用器具及其灭菌 常用的器具： 试管、瓶子、培养皿等 1887年，R J Petri 发明 Petri dish 参见P14 装有培养基后称为“培养平板” Or